[发明专利]一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用

说明书

本发明公开了一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用。通过从镜湖中腐烂的水华中筛选得到了一株菌株R1，该菌株具有较强的耐镉能力、溶藻以及可降解微囊藻毒素，经16S rDNA序列对比分析鉴定，R1属于气单胞菌属(Aeromonas)。该菌株对Cd²⁺有很好的耐受性，在含有50mg/LCd²⁺的培养基中仍能正常生长；细菌通过分泌胞外物质溶解铜绿微囊藻，且该物质耐高温，非核酸和多糖类等物质；在0.1mg/L Cd²⁺存在的情况下，细菌溶藻能力增强；在微囊藻毒素的初始浓度为1.84mg/L时，7天时间降解率为43.5％。

技术领域

本发明涉及一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用。

背景技术

近年来，许多城市的河道、湖泊等水体都受到了污染。不仅氮磷超标，造成水体富营养化程度越来越严重，蓝藻水华频发，产生了许多种毒素，包括最危险的微囊藻毒素，而且重金属物质大量留存，影响人体健康。

对于这类复合污染水体，单一的物理、化学方法都难以修复或控制，还可能对水体造成二次污染，而微生物去除蓝藻和微囊藻毒素具有效率高、安全性强和环境友好等优势。已有研究发现的溶藻微生物包括：真菌类的赤霉菌属、青霉菌属，细菌类的假单胞菌、交替假单胞菌、寡养单胞菌属和降解微囊藻毒素的不动杆菌、芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、假单胞菌、伯克氏菌等。但大多数研究只针对微生物的溶藻或降解藻毒素单一功能，对于复合污染水体，特别是重金属污染情况下的实际溶藻或降解藻毒素能力的研究较少。

发明内容

针对上述不足，本发明提供了一种气单胞菌属菌株R1及制备方法及其在溶藻降解微囊藻毒素上的应用。所述菌株R1具有较强的耐镉能力、溶藻以及可降解微囊藻毒素的能力。

本发明采取的技术方案为：

一种气单胞菌属(Aeromonas)菌株R1CGMCC No.14864，所述菌株R1已经于2017年11月6保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心 (CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.14864，建议的分类命名为气单胞菌Aeromonas sp.。

菌株R1的基因序列表如SEQUENCE LISTING4001所示。

菌株R1的菌落形态为圆形，乳白色，光滑半透明，边缘整齐，较粘稠，易挑起；革兰氏染色阴性，菌体呈短杆状，无芽孢；能利用葡萄糖产生有机酸但不产气；不能分解含硫有机物和不能分解色氨酸产生吲哚；与大肠杆菌，金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌共培养做抑菌实验，它们相互之间无影响。

本发明还提供了所述的气单胞菌属(Aeromonas)R1的应用，菌株R1可降解含镉废水中的微囊藻毒素并且具有溶藻的能力。其溶藻的机理是间接溶藻，通过分泌的丙氨酸和苯丙氨酸协同作用进行溶藻。

本发明还提供了所述气单胞菌属(Aeromonas)菌株R1的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

S1：将从安徽省芜湖市镜湖区镜湖中采集的腐烂的水华离心后，收集上清液；

S2：在无菌条件下将上清液接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中35～40℃震荡培养20～28小时得到菌液；

S3：将菌液接种到含镉的牛肉膏蛋白胨平板培养基上，35～40℃倒置培养 68～82小时；

S4：将长势良好的菌落纯化后接种到斜面培养基，2～6℃保存待用。

所述步骤S2中，上清液与牛肉膏蛋白胨液体培养基的体积之比为1：5～15。

所述步骤S3中，含镉的牛肉膏蛋白胨平板培养基中镉离子的浓度为 10～50mg/L。