[发明专利]检测产酸克雷伯菌的成套试剂

说明书

本发明公开了一种检测产酸克雷伯菌的成套试剂。本发明公开的检测产酸克雷伯菌的成套试剂由检测或辅助检测产酸克雷伯菌的引物对和探针组成；所述引物由名称分别为F和R的单链DNA组成；F为序列表的序列1所示的单链DNA分子；R为序列表的序列2所示的单链DNA分子；探针的序列为序列表的序列3。实验证明，本发明的检测产酸克雷伯菌的成套试剂在检测产酸克雷伯菌时，具有高特异性，高灵敏度以及很好的重复性与扩增效率，检测产酸克雷伯菌简便、快速、准确，可以用来检测产酸克雷伯菌和制备检测产酸克雷伯菌的试剂。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，检测产酸克雷伯菌的成套试剂。

背景技术

产酸克雷伯菌属于革兰氏阴性球菌。通常情况下，为条件致病菌。当皮肤粘膜受创伤后，或在人体免疫系统平衡缺失时，可能导致病人发生严重感染，如血流感染等。

血流感染(bloodstream infections，BSI)是指一种或多种病原微生物侵入机体血液循环，在血液中释放毒素，生长繁殖并释放代谢产物，引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)。

随着基因组学和蛋白质组学的发展，应用于临床实验室血流感染检测的分子生物学技术日益增多，如聚合酶链式反应，质谱，基因芯片，高通量测序等。

实时荧光定量PCR中的TaqManMGB探针法，属于聚合酶链式反应。TaqManMGB探针法能否实现感染性全血样本中产酸克雷伯菌病原体的直接检测，其关键在于能否设计一套灵敏度高，特异性好的引物探针，目前，国内外文献报道中尚未有相关MGB探针的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何检测产酸克雷伯菌。

本发明首先提供了用于检测或辅助检测产酸克雷伯菌的成套试剂，由检测或辅助检测产酸克雷伯菌的引物对和探针组成；

所述引物对由名称分别为F和R的单链DNA组成；

所述F为如下(a1)或(a2)；

(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；

(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；

所述R为如下(a3)或(a4)；

(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；

(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；

所述探针的序列为如下(a5)或(a6)；

(a5)序列表的序列3；

(a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的序列。

所述一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加具体可为1-5个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加。

所述探针可由荧光基团和淬灭基团修饰。所述荧光基团可为FAM荧光基团，所述淬灭基团可为NFQ-MGB。所述荧光基团和所述淬灭基团可位于所述探针的两端。在本发明的一个实施例中，所述荧光基团修饰在所述探针的5′端，所述非荧光淬灭基团修饰在所述探针的3′端。

所述引物对的两条单链DNA可独立包装，这两条单链DNA的摩尔比可为1:1。

所述成套试剂中的各单链DNA和探针均可独立包装。所述成套试剂中所述引物对的两条单链DNA和所述探针的摩尔比可为1：1：1。

本发明还保护所述检测产酸克雷伯菌的引物对。