[发明专利]DNA片段、含有该片段的重组载体及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201711362889.8 | 申请日： | 2017-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN108103086A | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | 赵臣;赵阳;赵佳琪;王婉莹;王丽;张梦凡;赵天宇 | 申请（专利权）人： | 吉林医药学院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/85;C12N15/66;A61K39/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 周明飞 |
| 地址： | 132013*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组载体 碱基序列 融合基因 引物序列 构建 扩增 外源多核苷酸 原始载体 基因 应用 | ||
1.DNA片段，其特征在于，由序列表中的SEQ ID NO.1所示的碱基序列组成。
2.含有外源多核苷酸的重组载体，其特征在于，包含原始载体以及MLAA34-B7H4融合基因；
其中，所述融合基因包含序列表中的SEQ ID NO.1所示的碱基序列组成的DNA片段。
3.如权利要求2所述的重组载体，其特征在于，所述原始载体为pEGFP-N1质粒。
4.构建含有外源多核苷酸的重组载体的方法，其特征在于，包括：
步骤一、利用序列表中的SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物序列通过PCR扩增得到含有SEQ ID NO.4所示的碱基序列的MLAA-34基因；
利用序列表中的SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的引物序列通过PCR扩增得到含有SEQ ID NO.7所示的碱基序列的B7-H4基因；
步骤二、以MLAA-34基因和B7-H4基因为模板，利用序列表中的SEQ ID NO.2和序列表中的SEQ ID NO.6所示的引物序列，通过SOE-PCR扩增得到序列表中的SEQ ID NO.1所示的MLAA34-B7H4融合基因，并且使其含有EcoRI和BamHI酶切位点；
步骤三、将步骤二所述的MLAA34-B7H4融合基因构建到原始载体上以得到重组载体。
5.如权利要求4所述构建含有外源多核苷酸的重组载体的方法，其特征在于，所述原始载体为pEGFP-N1质粒。
6.使用包括如权利要求2所述的重组载体在制备基因疫苗上的应用，其特征在于，所述重组载体包含序列表中的SEQ ID NO.1所示的碱基序列组成的DNA片段。
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