[发明专利]针对CD44高表达型肿瘤的基因靶向输送体系的制备方法

权利要求书

1.针对CD44高表达型肿瘤的基因靶向输送体系的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将透明质酸HA化学改性得到带醛基的氧化透明质酸HAD；(2)制备包裹siRNA的壳聚糖纳米粒CSNps-siRNA；(3)通过醛基与氨基的反应将步骤(1)制备的HAD共价交联到步骤(2)制备的CSNps-siRNA上，从而得到CSNps-siRNA-HAD靶向纳米粒；

步骤(1)所述的化学改性为通过醇相反应制备HAD，所述醛基的数目为两个，具体为：(a)将适量透明质酸溶解在体积分数为60-95％的乙醇中得到透明质酸的乙醇溶液；所述透明质酸在乙醇溶液中的质量体积比为5-10％；(b)将适量氧化剂溶解在水中得到氧化剂溶液，并将其加入到步骤(a)制备的透明质酸的乙醇溶液中，搅拌至氧化反应完毕；(c)采用体积分数不小于95％的乙醇沉淀并洗涤干燥，得到改性透明质酸；

所述HAD与CS的质量比为1:50-1:500；

所述透明质酸的糖苷环单元与氧化剂的摩尔比为2:1-10:1；

所述氧化剂溶液的浓度为0.1-1M；

所述步骤(2)具体为：(a)离子交联法制备CSNPs：称取适量CS粉末，制备得到CS的乙酸溶液，过滤；(b)称取适量三聚磷酸钠粉末，制备得到三聚磷酸钠的水溶液，过滤；(c)将适量siRNA与三聚磷酸钠的水溶液混合得到共混液，然后在搅拌条件下将共混液滴加到CS的乙酸溶液中，反应完毕即得到CSNps-siRNA；

所述CS和TPP的质量比为4:1-10:1；所述搅拌反应的时间为20min-60min；

所述步骤(3)具体为：在搅拌条件下，将适量HAD溶液加入到CSNps-siRNA溶液中；反应完毕后，透析即得到CSNps-siRNA-HAD靶向纳米粒，即针对CD44高表达型肿瘤的基因靶向输送体系。