[发明专利]一种快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2CDS序列的方法在审
| 申请号： | 201711360127.4 | 申请日： | 2017-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN108359672A | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 严明理;李隆;刘丽莉;张大为;伍小方 | 申请（专利权）人： | 湖南科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/82 |
| 代理公司： | 张家界市慧诚商标专利事务所 43209 | 代理人： | 高红旺 |
| 地址： | 411201*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 克隆 基因 油菜 种皮 转基因毛状根 大肠杆菌 发根农杆菌 芥菜型油菜 表达水平 公司测序 基因表达 基因转化 继代培养 扩增培养 种皮基因 种皮颜色 转录因子 反转录 毛状根 外植体 转基因 侵染 染液 叶片 转化 取材 新鲜 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2 CDS序列的方法，其特征是把构建好的TTG1基因转入到农杆菌A4的感受态中，再进行离心用等体积的MS液体重悬得到侵染液B,然后把油菜2周到3周龄的外植体，加入侵染液B中，在常温下浸染5-10分钟，然后进行共培养,24-48小时后，再转移到筛选培养进行培养，一周以后从外植体中剪下生长快速的毛状根，转移到继代培养基上，二周以后转移到液体培养基上进行扩大培养，一个月以后得到过表达的TTG1毛状根，TTG1表达可以促进TT2表达，从而可以克隆出来油菜TT2 CDS序列。
2.根据权利要求1所述的快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2 CDS序列的方法，其特征是，所述菌液A为制备好的A4发根农杆菌感受态。
3.根据权利要求1所述的快速克隆芥菜型油菜种皮基因TT2 CDS序列的方法，其特征是，所述的侵染液B由转化TTG1农杆菌A4且OD值(600）0.8离心用50ml体积MS液体进行重悬得到。
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