[发明专利]一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法

说明书

本发明公开了一种降低硫酸软骨素钠蛋白杂质的方法，通过碱提取，酶水解急升温等操作降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的含量，提高硫酸软骨素钠含量及收率，并且操作简单，降低成本。

技术领域

本发明所属领域为生物制药领域，涉及一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法。

背景技术

硫酸软骨素(chondroitin sulfate，简称CS)是一种天然酸性黏多糖，属生物高分子化合物。CS 有A、C 和D共3种异构体，均是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖组成，只是硫酸基位置不同。CS 广泛存在于人和一些动物如猪、牛、羊、鱼等软骨组织中，且通过共价键与核心蛋白相结合。CS 具有促进冠状动脉循环、降血脂、抗凝血、抗肿瘤和防止血管硬化等活性，主要是治疗风湿和类风湿疾病的药物，对冠心病、动脉粥样硬化、心肌梗塞等心血管疾病的防治有一定疗效。CS已成为国外流行的保健品添加剂。目前国内生产企业生产的工艺产品蛋白杂质处理不干净，不仅影响产品的质量，而且还对产品的含量造成一定的影响。

发明内容

本发明提供了一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法，可以有效减少硫酸软骨素钠中蛋白杂质的量，提高硫酸软骨素钠的含量及收率。

本发明采用以下技术方案予以实现：

一种降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的方法，其特征主要包括以下步骤：

1）、处理过的猪鼻骨与1-3mol/L氢氧化钠溶液按照1:5-6的质量比混合，加热搅拌提取，提取温度为40-55℃，提取时间5-6小时，过滤，取滤液；

2）、向步骤1）中的滤液加入3-4mol/L盐酸溶液调pH在5.0-6.0之间，按照料液比为100:1-1.5的比例加入胃蛋白酶，在35-40℃下水解2-3小时，并稳定pH在5.0-6.0之间，过滤；

3）、向步骤2）中水解完后的滤液中加入1-3 mol/L氢氧化钠溶液调节pH在10-11之间，按照料液比为100:1-1.5的比例加入胰蛋白酶，35-40℃下水解2-3小时，迅速升温至50-60℃，不断搅拌，保持10-30分钟，过滤；

4）、向步骤3）中的滤液中按照滤液与双氧水的比例为20:1-3的比例加入双氧水氧化，6-7小时后过滤，滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至60%-75%之间，静置6-7小时后过滤，沉淀进行干燥。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：

本发明的核心优势是可以有效降低硫酸软骨素钠中蛋白杂质的含量，提高硫酸软骨素钠的含量及收率，并且降低成本。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

1）、处理过的猪鼻骨1kg与1mol/L氢氧化钠溶液按照6L混合，加热搅拌提取，提取温度为50℃，提取时间5小时，过滤，取滤液约5.1L；

2）、向滤液加入3mol/L盐酸溶液调pH在5.5，加入胃蛋白酶20g，在40℃下水解3小时，并稳定pH在5.0-6.0之间，过滤；

3）、向水解完后的滤液中加入3 mol/L氢氧化钠溶液调节pH在10.1之间，加入胰蛋白酶20g， 40℃下水解3小时，迅速升温至60℃，不断搅拌，保持10分钟，过滤；

4）、向滤液中加入双氧水氧化200mL，6小时后过滤，滤液在不断搅拌下加入95%乙醇至72%，静置6小时后过滤，沉淀进行干燥。经检测硫酸皮肤素有水含量为82%，蛋白杂质未检出。

实施例2