[发明专利]同时检测七种水仙RNA病毒的多重RT-PCR检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.基于7重RT-PCR的鉴定七种水仙RNA病毒的成套引物对，由用于鉴定水仙黄条病毒的特异引物对A、用于鉴定水仙退化病毒的特异引物对B、用于鉴定水仙潜隐病毒的特异引物对C、用于鉴定南芥菜花叶病毒的特异引物对D、用于鉴定水仙普通潜隐病毒的特异引物对E、用于鉴定水仙花叶病毒的特异引物对F和用于鉴定尼润潜隐病毒的特异引物对G组成；

所述特异引物对A由引物NYSV-F和引物NYSV-R组成；

所述特异引物对B由引物NDV-F和引物NDV-R组成；

所述特异引物对C由引物NLV-F和引物NLV-R组成；

所述特异引物对D由引物ArMV-F和引物ArMV-R组成；

所述特异引物对E由引物NCLV-F和引物NCLV-R组成；

所述特异引物对F由引物NMV-F和引物NMV-R组成；

所述特异引物对G由引物NeLV-F和引物NeLV-R组成；

所述引物NYSV-F为序列表中序列1所示的单链DNA分子；

所述引物NYSV-R为序列表中序列2所示的单链DNA分子；

所述引物NDV-F为序列表中序列3所示的单链DNA分子；

所述引物NDV-R为序列表中序列4所示的单链DNA分子；

所述引物NLV-F为序列表中序列5所示的单链DNA分子；

所述引物NLV-R为序列表中序列6所示的单链DNA分子；

所述引物ArMV-F为序列表中序列7所示的单链DNA分子；

所述引物ArMV-R为序列表中序列8所示的单链DNA分子；

所述引物NCLV-F为序列表中序列9所示的单链DNA分子；

所述引物NCLV-R为序列表中序列10所示的单链DNA分子；

所述引物NMV-F为序列表中序列11所示的单链DNA分子；

所述引物NMV-R为序列表中序列12所示的单链DNA分子；

所述引物NeLV-F为序列表中序列13所示的单链DNA分子；

所述引物NeLV-R为序列表中序列14所示的单链DNA分子；

所述七种水仙RNA病毒为水仙黄条病毒、水仙退化病毒、水仙潜隐病毒、南芥菜花叶病毒、水仙普通潜隐病毒、水仙花叶病毒和尼润潜隐病毒。

2.权利要求1所述的成套引物对在如下h1）-h8）任一项中的应用：

h1）制备用于鉴定七种水仙RNA病毒的产品；

h2）鉴定七种水仙RNA病毒；

h3）制备用于鉴定待测病毒是否为七种水仙RNA病毒的产品；

h4）鉴定待测病毒是否为七种水仙RNA病毒；

h5）制备用于鉴别七种水仙RNA病毒的产品；

h6）鉴别七种水仙RNA病毒；

h7）制备用于检测待测样品中是否含有七种水仙RNA病毒的产品；

h8）检测待测样品中是否含有七种水仙RNA病毒；

所述七种水仙RNA病毒为水仙黄条病毒、水仙退化病毒、水仙潜隐病毒、南芥菜花叶病毒、水仙普通潜隐病毒、水仙花叶病毒和尼润潜隐病毒。

3.含有权利要求1所述成套引物对的试剂盒，其特征在于

所述试剂盒的功能为如下i1）-i4）中任一种：

i1）鉴定七种水仙RNA病毒中1-7种；

i2）鉴定待测病毒是否为七种水仙RNA病毒；

i3）鉴别七种水仙RNA病毒；

i4）检测待测样品中是否含有七种水仙RNA病毒；

所述七种水仙RNA病毒为水仙黄条病毒、水仙退化病毒、水仙潜隐病毒、南芥菜花叶病毒、水仙普通潜隐病毒、水仙花叶病毒和尼润潜隐病毒，其中所述引物NYSV-F、NYSV-R、NDV-F、NDV-R、NLV-F、NLV-R、ArMV-F、ArMV-R、NCLV-F、NCLV-R、NMV-F、NMV-R、NeLV-F和NeLV-R的摩尔比为1:1:1:1:1:1:4:4:2:2:2:2:4:4。

4.权利要求3所述试剂盒的制备方法，为如下（Ⅰ）或（Ⅱ）：

（Ⅰ）权利要求1所述的成套引物对中各引物对的各条引物分别单独包装；

（Ⅱ）权利要求1所述的成套引物对中各引物对的各条引物按权利要求3所述的摩尔比比例混合在一起。