[发明专利]从三七中提取三七总皂苷的新方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从三七中提取三七总皂苷的新方法，特别是涉及一种利用生物酶解，微波提取技术纯化总皂苷的新方法。

背景技术：

三七多年生草本，高达30-60cm。根茎短，具有老茎残留痕迹；根粗壮肉质，倒圆锥形或短圆柱形，长约2-5cm，直径约1-3cm，有数条支根，外皮黄绿色至棕黄色。茎直立，近于圆柱形；光滑无毛，绿色或带多数紫色细纵条纹。掌伏复叶，3-4枚轮生于茎端；叶柄细长，表面无毛；小叶3-7枚；小叶片椭圆形至长圆状倒卵形，长约5-14cm，宽2-5cm，中央数片较大，最下2片最小，先端长尖，基部近圆形或两侧不相称，边缘有细锯齿，齿端偶具小刺毛，表面沿脉有细刺毛，有时两面均近于无毛；具小叶柄。总花梗从茎端叶柄中央抽出，直立，长20-30cm；伞形花序单独顶生，直径约3cm；花多数，两性，有时单性花和两性花共存；小花梗细短，基部具有鳞片状苞片；花萼绿色，先端通常5齿裂；花瓣5，长圆状卵形，先端尖，黄绿色；雄蕊5，花药椭圆形，药背着生，内向纵裂，花丝线形；雌蕊1，子房下位，2室，花住2枚，基部合生，花盘平坦或微凹。核果浆果状，近于肾形，长约6-9mm；嫩时绿色。熟时红色，种子1-3颗，球形，种皮白色。花期6-8月。果期8-10月。

三七具有“生打熟补”功效，即服生三七，能活血化瘀，消肿止痛，参治跌打劳伤有效；服熟三七(用鸡油或其他油将生三七炸黄即成熟三七)，能补血强身。经科学研究并通过临床试验证明：三七与人参一样，含有四环三萜等补养成份，而且比人参含量还高，三七所含的酮类化合物，能促进血液循环，扩张冠状动脉，降低心脏耗氧量，减轻心肌工作负担。

现代药理学研究表明，三七总皂苷是三七的主要有效成分。三七总皂苷是根据提取、分离技术从优质三七中提取有效的药用成分包括20多种皂苷活性物质、17种微量元素、蛋白、丰富的维生素、多糖等。主要功能降低机体的耗氧量，提高机体对缺氧的耐受力，抑制由ADP引起的家兔血小板聚集，扩张脑血管，使脑血流量增加，抗血栓和抗凝血作用。

发明内容：

本发明优点：

本发明主要采用生物酶解技术，微波提取技术，缩短提取时间，减少杂质溶出，提高收率。本发明方法提取快捷、产品纯度高，得率高，无化学残留。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种利用生物酶解，微波提取技术纯化总皂苷的新方法，其步骤如下：

(1)生物酶解：干燥三七粉碎至40-80目，加入一定浓度的乙醇溶液，黑曲酶浓度0.5-1.0g/l，酶解温度40-50℃，酶解时间2-4h，得混合液；微波提取，微波功率为300～600W，频率3000～10000MHz，萃取时间60-80min，在一定温度和料液比下提取；

(2)将提取液经陶瓷膜过滤器在过滤精度0.2-0.5微米，过滤压力0.2-0.3MPa，5-10m/s滤速下过滤；

(3)大孔树脂吸附：将所得溶液上大孔树脂吸附，流速为3-5BV/h，吸附温度为40-45℃；

(4)乙醇洗脱：在常温常压下，以1-3BV/h流速，先用10-30％乙醇液除杂，洗掉溶液中的色素、鞣质、无机盐类等水溶性杂质；

(5)碱液洗脱：再用碱溶液在1-3BV/h流速、洗脱体积为6-8BV下进行洗脱，洗脱液用薄层层析跟踪监测；

(6)收集洗脱液浓缩，回收碱液，减压干燥，得到含量为65％以上半成品粗粉；

(7)硅胶柱层析：将所得粗粉溶于碱液加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级柱硅胶柱层析，并以氯仿-甲醇溶液以95～85∶2比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集三七总皂苷各阶段洗脱液；

(8)冷冻干燥：所得液冷冻24h，放在真空干燥设备里，抽真空，加热温度为45℃，干燥一定时间后取出，得到高纯度三七总皂苷，其含量在95％以上。

所述步骤(1)中，乙醇溶液的浓度为70％-90％，加入量为1∶10-1∶12；微波提取温度为50-60℃；

所述步骤(3)中，大孔树脂型号为AB-8，LX-100，D101，GDXI04，X5，D201等；

所述步骤(8)中，冷冻干燥真空压力为10-12Pa；时间为3-4小时。

具体实施方式：

实施例1：一种利用生物酶解，微波提取技术纯化总皂苷的新方法，其步骤如下：