[发明专利]生防植物内生真菌及其在防治经济作物灰霉病中的应用

说明书

本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防植物内生真菌DA‑1及其在经济作物灰霉病防治中的应用。具体而言，本发明公开了一种生防植物内生真菌DA‑1，为Arcopilus aureus，保藏编号为CGMCC NO.14156。本发明还同时公开了上述生防植物内生真菌DA‑1的用途：抑制灰葡萄孢菌菌丝生长；用于防治经济作物的灰霉病。

技术领域

本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防植物内生真菌DA-1及其在经济作物灰霉病防治中的应用。

背景技术

由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)引起的灰霉病，是世界第二重要的植物真菌病害，每年用于该病害防治的费用超过1亿欧元。该病原菌可通过菌丝、分生孢子和菌核多种感染方式对植株进行侵染，可快速引发植株的软腐，导致植株器官破坏和功能丧失。在该病菌侵染的后期可在植株的表面产生数量众多肉眼清晰可见的分生孢子，可通过风力和水流传播到临近的植株表面进行侵染。

防治灰霉病的方式依然是化学防治为主，具有着快捷、廉价、高效的优势。目前对其使用的药剂种类主要有：苯并咪唑类、二甲酰亚胺类、苯胺基嘧啶类、吡咯类、酰胺类、琥珀酸脱氢酶类杀菌剂等七大类杀菌剂。但在频繁使用化学农药及灰葡萄孢菌繁殖遗传变异快和适合度高的特点，使得该菌快速产生抗性，影响杀菌剂防治效果。而生物防治方法可有效解决及避免杀菌剂的抗性问题，生物防治具有高效且无毒、无害、无污染、不产生抗药性，不仅符合人们对绿色食品的需求，而且为农业的可持续发展提供了保障，因此，植物病害生物防治的研究越来越受到重视。

植物内生真菌(Endophyte Fungi)是指生活在植物活组织内而不引起任何直接和明显植物病变的一大类真菌，内生真菌与宿主植物关系密切，不仅将植物作为栖息场所，而且它对寄主植物有促生、防病、内生固氮等多方面的生物学作用。

植物内生菌具有着丰富的多样性，主要包括物种多样性、宿主多样性、生境多样性、形态多样性以及遗传多样性，是生防菌株重要的宝库；其次内生真菌在植株的体内，在病害爆发时具有更强的竞争优势；最后内生真菌来源于植物体内，与土壤中分离得到的生防菌株相比更易定植。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种生防植物内生真菌DA-1及其应用，生防植物内生真菌DA-1对灰葡萄孢菌的菌丝生长具有较好的抑制作用，对田间经济作物灰霉病具有较好的防治效果。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种生防植物内生真菌DA-1，为Arcopilusaureus，保藏编号为CGMCC NO.14156。

本发明还同时提供了上述生防植物内生真菌DA-1的用途：抑制灰葡萄孢菌菌丝生长。

作为本发明的生防植物内生真菌DA-1的用途的改进：用于防治经济作物的灰霉病。

作为本发明的生防植物内生真菌DA-1的用途的进一步改进：所述经济作物为草莓。

作为本发明的生防植物内生真菌DA-1的用途的进一步改进：包括以下步骤：

1)、制备生防植物内生真菌DA-1发酵液(发酵液中含有抑菌物质)；

2)、分离、纯化发酵液(即，分离、纯化发酵液中的抑菌物质)，得纯化发酵液；

3)、将纯化发酵液稀释后施于经济作物上。

作为本发明的生防植物内生真菌DA-1的用途的进一步改进，所述步骤1)为：

①、生防植物内生真菌DA-1在PDA培养基上活化后，打取0.5cm直径菌饼，以“井”字切割，作为菌种；

②、将菌种接种于PD液体培养基中，在转速150rpm，温度28℃恒温摇床中培养4～12天，获得发酵液。