[发明专利]NOK基因及其表达产物在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途

说明书

本申请涉及NOK基因及其表达产物在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途。本发明人的研究表明：来源于人12号染色体的基因NOK，可诱导NOK转基因小鼠(NOK‑tg)自发地产生慢性淋B淋巴细胞白血病(B‑CLL)。在外周淋巴器官中常可检测到了CD5⁺CD19⁺B细胞的扩增，且伴随着记忆性B淋巴细胞的扩增。尽管NOK‑tg鼠间常存在免疫表型的异质性，但骨髓的检测发现B淋巴细胞早期发育常呈现显著的抑制。重要的是，骨髓分析结果表明NOK诱发的慢性B淋巴细胞白血病可能始于B淋巴细胞定向分化前的原始阶段。因此，NOK基因表达的遗传改变很大程度上诱使造血干细胞向B‑CLL方向发展。

技术领域

本申请涉及生物和医学领域。尤其是NOK基因在构建慢性B淋巴细胞白血病动物模型中的用途。

背景技术

慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)是西方人群中最常见的白血病类型，主要由CD5⁺/CD19⁺B淋巴细胞积累和克隆化扩增引起的(1-4)。B-CLL在美国和英国的发病率高于每10万人3.5和6.15例(2)。随着年龄的增加，发病率也在上升。发病的高峰年龄平均在65岁左右(4)。B-CLL的病程进展可以呈现惰性或侵润性两种。大多数患者通常会在确诊后存活数十年，然后死于白血病。相反，这种疾病偶尔也会发展成为侵润性的形式。虽然给予积极的强化治疗，患者也会很快死亡。

B-CLL是一种异质性疾病，不仅在临床表现的严重程度有显著差异，在B细胞受体(BCR)相关的突变状态和信号传导事件上也存在明显的不同(1)。B-CLL可根据免疫球蛋白重链可变区(IGHV)的突变状态，分为突变B-CLL(M-CLL)和未突变B-CLL(U-CLL)(5，6)。M-CLL的存在表明CLL的一些克隆创始细胞能像正常的B淋巴细胞一样，在生发中心或者外部与抗原相遇时IGHV基因可能发生体细胞高频突变(7)。U-CLL被认为是微生物和自身抗原反复刺激后的白血病细胞的克隆化扩增。不管IGHV的突变状态如何，M-CLL和U-CLL细胞的基因表达谱与记忆B细胞的基因表达谱类似(8,9)。在非突变的U-CLL中，B细胞在抗原与表面IgM连接后通常具备信号传导能力(10)，并且多数情况下，他们高表达与致命结果相关的CD38⁺和/或ZAP^-70+分子(11-15)。相反，在突变的M-CLL细胞中，IGHV基因突变可能最终阻断抗原与BCR接合后所引发的BCR介导的信号级联反应(10,16)。这种信号传导阻断可能主要是由于IGHV基因突变而导致抗原识别的无效性或高亲合力。具有很少的CD38⁺及很少的ZAP-70+表达的M-CLL细胞通常是惰性的(17)。尽管对B-CLL的发病原因进行了深入的研究，但是B-CLL细胞的起源仍然不确定。种族差异和遗传病变可能对B细胞慢性白血病(B-CLL)的形成有很大的影响(18-20)。流行病学研究结果指出，由于西方国家中亚洲移民的B-CLL发病率很低，因此，环境因素应该不是B-CLL发生的主导因素(19)。一级对比分析结果表明B-CLL的家族相关性很高，提示一些易感基因可能对早发B-CLL起作用(21,22)。对大样本B-CLL患者进行分子分析后结果揭示CLL患者存在多种的基因组异常，如染色体13q14缺失(约占病例的50％)(23，24)和12号染色体三体(约占案例16-35％)(25-27)。

发明内容

NOK是源于与B-CLL三体相关的人12号染色体编码的新型致癌基因。该基因可诱导细胞转化以及动物的肿瘤发生和转移(28，29)。

本发明人利用NOK-tg小鼠，在整个动物水平研究了NOK基因功能，发现NOK-tg鼠可自发形成与人类B-CLL非常相似的B淋巴细胞疾病。免疫表型分析强烈表明NOK在骨髓微环境中把未分化的干细胞转化成B-CLL。

根据这样的事实，本公开提供了NOK基因或其表达产物在构建慢性淋巴细胞白血病动物模型中的用途。

在一些实施方式中，所述的慢性淋巴细胞白血病是慢性B淋巴细胞白血病。