[发明专利]一种长链非编码RNA及其组合物在诊断/治疗胆管癌中的应用

说明书

本发明属于基因工程领域，特别涉及一种长链非编码RNA，PVT1及其组合物，在制备诊断胆管癌及靶点药物治疗中的应用。同时，本发明还涉及其引物，在制备诊断直结肠癌试剂中的应用。通过研究该长链非编码RNA细胞水平的表达，揭示了其与胆管癌发病机理的关系。

技术领域

本发明属于基因工程领域，特别涉及一种长链非编码RNA，PVT及其组合物，在制备诊断胆管癌及靶点药物治疗中的应用。同时，本发明还涉及其引物，在制备诊断胆管癌试剂中的应用。通过研究该长链非编码RNA细胞水平的表达，揭示了其与胆管癌发病机理的关系。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类健康的一大主要元凶，对肿瘤恶性进展的分子机制研究一直是学界关注的焦点与难点。已有研究报道，肿瘤细胞在生长过程中具有促进增殖和侵袭转移，持续血管生成，免疫耐受及免疫逃逸等细胞表型特征。研究表明，肿瘤细胞的生长是一个复杂的多基因调控和多步骤、多阶段发展的过程，包括p53、p21等抑癌基因的失活和Blc1、Myc 等原癌基因的激活。迄今为止，恶性肿瘤的发生机制仍未完全清楚，需要进一步探索。

研究显示：除这些已被广泛研究的编码基因外，长非编码RNA(long noncodingRNAs， lncRNAs)的异常表达也参与肿瘤恶性进展。lncRNAs是一类转录本长度超过200nt的RNA 分子，有别于其他小分子非编码RNA，其可以顺式(in cis)或反式(in trans)作用的方式调节RNA代谢、蛋白质功能活性、组蛋白修饰及染色质重塑，在表观遗传学、转录以及转录后水平广泛参与细胞生物学过程。越来越多的研究证实，lncRNAs不仅在维持机体的正常生理功能及发育过程中发挥重要的调控作用，其异常表达与疾病的发生发展尤其是肿瘤的恶性进展有着密切的联系。

胆管癌(cholangiocarcinoma，CCA)是起源于胆管上皮细胞的高度侵袭性的恶性肿瘤，其全球发生率，尤其是在亚洲国家中呈逐年上升趋势，5年生存率不足5％。胆管癌早期发病隐匿，常无明显的临床表现，明确诊断时已至中晚期。尽管目前已有手术、放疗、化疗等临床治疗手段，但是胆管癌患者的预后仍很差。已有研究表明，lncRNAs的异常表达介导胆管癌恶性进展。上调的H19和HULC可通过ceRNA机制促进胆管癌细胞的迁移和侵袭。lncRNA CPS1intronic transcript 1(CPS1‐IT1)可促进胆管癌细胞的增殖及抑制凋亡，且影响病人的肝功能及预后。进一步文献检索结果显示：lncRNAs可以通过发挥原癌基因的作用，参与胆管癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移等生物学过程，提示更多胆管癌恶性进展相关lncRNAs的功能和机制具有进一步研究的必要性。

发明内容

本发明的目的是提供一种长链非编码RNA在诊断胆管癌以及在制备治疗胆管癌药物中的应用。本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种长链非编码RNA，PVT1，其特征在于，长度为1957bp，其序列如SEQID NO:1所示，即:

检测上述长链非编码RNA的试剂在制备诊断胆管癌试剂中的应用

进一步的，本发明还提供一种药物组合物，包括诊断上述长链非编码RNA的检测试剂。

进一步的，所述的药物组合物在制备治疗胆管癌药物中的应用。

另一方面，本发明还提供两组检测PVT1的引物组，其序列分别如SEQ ID NO：2、3和4、5所示，即：SEQ ID NO:2PVT1FTGAGAACTGTCCTTACGTGACC，SEQ ID NO：3PVT1RAGAGCACCAAGACTGGCTCT，SEQ ID NO:4FAGCCACATCGCTCAGACAC，SEQ ID NO:5RGCCCAATACGACCAAATCC。

进一步的，本发明请求保护上述任意一种引物在制备诊断胆管癌试剂中的应用。