[发明专利]免疫组化检测切片的制备方法

说明书

本发明公开了一种免疫组化检测切片的制备方法，包括如下步骤：获取待检测组织样品的石蜡切片，并将所述石蜡切片平铺于塑料膜上，石蜡切片与塑料膜紧密粘结形成贴附塑料膜的石蜡切片，烤片；对所述烤片后的贴附塑料膜的石蜡切片打孔，获得至少一片直径为1～30mm的圆形的贴附塑料膜的石蜡切片；将所述圆形的贴附塑料膜的石蜡切片转移至酶标板中，每孔一片，经脱蜡水化后获得圆形的贴附塑料膜的亲水性组织切片；对所述圆形的贴附塑料膜的亲水性组织切片进行染色，即可。本发明通过发明人创造性地将塑料膜与石蜡切片紧密粘结在一起，再经过打孔获得多个石蜡切片，最终实现采用一片待检测组织的石蜡切片制备多张切片，同时满足多项检测的需求。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种免疫组化检测切片的制备方法。

背景技术

切片检查(pathological examination)指的是病理检查的一种，用以检查机体器官、组织或细胞中的病理改变的病理形态学方法。目前，切片检查已经大量应用于临床工作、科学研究，镜检切片的制备对于结果的诊断起着关键作用。传统镜检切片的制备主要是取大小为2.0cm×2.0cm×0.3cm的病理组织包埋于石蜡中，然后对其进行切片获得石蜡切片，再将所得的整片的石蜡切片贴附在载玻片上进行染色，每一整片的石蜡切片仅能进行一次染色、制备一张镜检切片，最终获得一个结果。

由于在实际检测中，临床组织样品少，加上切片制作的复杂性，以及需要对同一个待检测组织样品进行多种抗原或者抗体或其他相关的检测，需要用到多个检测切片，因此，传统的检测切片制备方法难以满足后续多样性检测的需求。

发明内容

基于此，有必要提供一种通过一片待检测组织样品的石蜡切片就能够得到多张检测切片的方法。

一种免疫组化检测切片的制备方法，包括如下步骤：

获取待检测组织样品的石蜡切片，并将所述石蜡切片平铺于塑料膜上，石蜡切片与塑料膜紧密粘结形成贴附塑料膜的石蜡切片，烤片；

对所得贴附塑料膜的石蜡切片打孔，获得至少一个直径为1～30mm的圆形的贴附塑料膜的石蜡切片；

将所述圆形的贴附塑料膜的石蜡切片转移至酶标板中，每孔一片，经脱蜡水化后获得圆形的贴附塑料膜的亲水性组织切片；

对所述圆形的贴附塑料膜的亲水性组织切片进行染色，即可。

在其中一些实施例中，所述圆形的贴附塑料膜的石蜡切片的直径为3～20mm。

在其中一些实施例中，所述塑料膜为耐受温度不低于265℃的塑料膜；所述塑料膜的脆性温度不高于-196℃的塑料膜。

在其中一些实施例中，所述塑料膜为聚酰亚胺塑料膜或聚萘酯塑料膜(2,6萘二甲酸乙二醇酯薄膜)。

在其中一些实施例中，所述塑料膜的厚度为6～250μm。

在其中一些实施例中，所述塑料膜的厚度为30～250μm。

在其中一些实施例中，所述烤片的条件为：温度为60～65℃、时间为25～30mi n。

在其中一些实施例中，所述塑料膜还进行如下预处理：先在所述塑料膜的表面涂覆体积比为5：(1～3)的蛋清、阴离子聚电解质水溶液的混合物后干燥，再在所述塑料膜预铺设石蜡切片的表面涂覆阳离子聚电解质溶液后干燥。

在其中一些实施例中，所述阴离子聚合物可为聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚苯乙烯磺酸、聚乙烯磺酸或聚乙烯磷酸；所述阳离子聚电解质可为聚乙烯胺、聚乙烯吡啶、聚二烯丙二甲基氯化铵或聚乙烯亚胺。

在其中一些实施例中，所述塑料膜在涂覆所述混合物、阳离子聚电解质溶液后均需转移至密封容器内，在沸点、表面张力均小于水的溶剂的蒸汽环境中进行蒸汽处理。