[发明专利]动物用粘膜靶向免疫增强剂及其在兽用疫苗中的应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，具体涉及动物用粘膜靶向免疫增强剂及其在兽用疫苗中的应用。针对目前现有技术中存在的问题，以及对于理想兽用疫苗的期待，本发明公开了一种动物用粘膜靶向免疫增强剂，含有0.5μg～500μg/mL的CpG、0.1μg～1mg/mL的α‑GC、0.1μg～3mg/mL的Poly（I:C）、1μg～5mg/mL的PLGA、0.1μg～5mg/mL的PEI、1μg～10mg/mL壳聚糖。同时还公开了该动物用粘膜靶向免疫增强剂在兽用疫苗中的应用可能及应用方法。从而能够产生良好的粘膜免疫，同时缩短免疫窗口期，有效降低抗原用量和产生消除性免疫。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及动物用粘膜靶向免疫增强剂及其在兽用疫苗中的应用。

背景技术

各类病毒性传染病制约我国乃至世界养殖业发展，造成重大经济损失，甚至危及人类的公共卫生安全。目前临床大量使用的基于矿物油佐剂制备的灭活疫苗，对防控这些疫病发挥了重要作用。但这些疫苗仍存在一定的缺陷，疫苗质量有待于进一步提升。这些缺陷包括以下几个方面：

第一，基于矿物油的灭活疫苗免疫机体后几乎不产生粘膜抗体。然而病毒感染的主要途径为粘膜途径。因此，粘膜是宿主防御系统的第一道防线。提高粘膜免疫应答，可以将病毒等病原体在即将进入宿主时清除或阻拦，从而降低感染疫病的风险。

第二，基于矿物油的灭活疫苗免疫机体后副反应较大。具体来说，对于快速出栏的肉鸡，矿物油疫苗难以吸收，会影响肉质和后续食用。而对于蛋鸡，会对蛋鸡产生产蛋下降的影响。对于猪、牛等，矿物油疫苗免疫后会导致发烧，肿大，采食下降等严重副反应。

第三，基于矿物油的灭活疫苗免疫后抗体的产生期较长。基于矿物油疫苗免疫后，一般在免疫后第3周达到有效保护的合格抗体，导致有较长的时间处于无法对野外变异毒株提供有效保护的状态。这就给临床生产带来很大的疫病风险。

第四，基于矿物油的灭活疫苗，需要较高的疫苗抗原含量。兽用疫苗采用提高抗原量来提高疫苗的免疫后的效力，但兽用疫苗受限于低廉的价格，导致疫苗抗原纯度差，杂蛋白较多，也导致副反应较大。

综上所述，一种理想的兽用疫苗应当具有以下特征：（1）能产生高水平粘膜免疫；（2）易于吸收，几乎无副反应；（3）抗体产生期短，抗体效价高，持续期长；（4）在保证疫苗效力的前提下，有效降低抗原用量，降低副反应，降低生产成本；（5）能产生消除性免疫。从而为控制疫病、最终扑灭和消除疫病，提供强有力的技术支持。

发明内容

针对目前现有技术中存在的问题，以及对于理想兽用疫苗的期待，本发明的发明目的之一是提供一种能够产生良好的粘膜免疫，同时缩短免疫窗口期，有效降低抗原用量和产生消除性免疫的动物用粘膜靶向免疫增强剂。

本发明的另一发明目的是提供前述动物用粘膜靶向免疫增强剂在兽用疫苗中的应用可能及应用方法。

本发明公开的动物用粘膜靶向免疫增强剂含有0.5μg～500μg/mL的CpG、0.1μg～1mg/mL的α-GC、0.1μg～3mg/mL的Poly（I:C）、1μg～5mg/mL的PLGA、0.1μg～5mg/mL的PEI、1μg～10mg/mL壳聚糖。

所述CpG、α-GC、Poly（I:C）、PLGA、PEI和壳聚糖的质量浓度比为1:(3～8):(2～8):(2～8):(3～7): (2～7)。

更为优选地，所述CpG、α-GC、Poly（I:C）、PLGA、PEI和壳聚糖的质量浓度比为1:(4～6):(3～5):(4～6):(3～5): (3～5)。

本发明公开的动物用粘膜靶向免疫增强剂的制备方法为：在磷酸盐缓冲溶液中分别加入CpG、α-GC、Poly（I:C）、PLGA、PEI和壳聚糖，调节pH至7.0-7.2， 制备成混合溶液，过滤、除菌，即得。