[发明专利]生物发酵生产长链二元酸的方法

权利要求书

1.生物发酵生产长链二元酸的方法，其特征在于：所述发酵开始时，或者，所述发酵过程中，菌体浓度达到OD₆₂₀为50～200，优选90～160。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述菌体经浓缩后，再加入发酵体系中。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：将所述菌体培养，当菌体浓度达到OD₆₂₀为15～30时，将菌体浓缩，再加入发酵体系中。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述菌体的浓缩倍数为2～40倍，优选5～30倍，进一步优选5～20倍。

5.如权利要求2-4任一项所述的方法，其特征在于：所述浓缩的方法为离心分离或膜分离；

其中，所述离心分离的离心力为2000G以上；所述膜分离使用微滤膜或超滤膜进行分离；当采用微滤膜分离时，所述微滤膜为孔径0.1～1μm的有机或无机膜，分离时的压力为0.01～0.2Mpa；当采用超滤膜分离时，所述超滤膜为膜截留分子量1～1,000KDa的有机或无机膜，分离时的压力为0.1～1.0Mpa。

6.如权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵培养基的添加量为发酵罐体积的80％以下，优选5～50％，更优选15～40％，最优选15～30％。

7.如权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于：加入菌体前，加入所述发酵培养基；或者，加入所述菌体时，加入所述发酵培养基；或者，所述发酵过程中，加入所述发酵培养基；

和/或，所述发酵培养基以连续或者间歇的方式补加。

8.如权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于：所述菌种为热带假丝酵母(CandidaTropicalis)或清酒假丝酵母(Candida sake)。

9.如权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵的底物包括C9～C18的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯和直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选包括C11～C16的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯和直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；更优选为C11、C12、C13、C15、C14或C16的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯和直链饱和脂肪酸盐中的一种；

所述发酵过程中，所述烷烃以连续或间歇的方式加入；

和/或，所述长链二元酸包括壬二酸、癸二酸、十一碳二元酸、十二碳二元酸、十三碳二元酸、十四碳二元酸、十五碳二元酸、十六碳二元酸、十七碳二元酸、十八碳二元酸、或9-烯-十八碳二酸中的一种或多种。

10.如权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于：所述发酵时的罐温为27～35℃；

和/或，所述发酵时的通风比为1∶1.0～0.2vvm；

和/或，所述发酵时的罐压为0.05～0.1Mpa；

和/或，所述发酵时的pH为7.0～8.5；

和/或，所述发酵时间为100～170h。