[发明专利]一种减少及推迟芽孢杆菌芽孢生成的分子改造方法有效
| 申请号： | 201711318230.2 | 申请日： | 2017-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN108070602B | 公开（公告）日： | 2020-11-06 |
| 发明（设计）人： | 郭庆文;王兴吉;刘文龙;张杰;钱娟娟 | 申请（专利权）人： | 山东隆科特酶制剂有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C07K14/32;C12N15/75 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 276400 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 减少 推迟 芽孢 杆菌 生成 分子 改造 方法 | ||
1.一种减少及推迟枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC 6051a芽孢生成的分子改造方法，其特征在于，是通过在宿主细胞中表达SEQ ID NO.1所示的调节基因来完成的。
2.如权利要求1所述的一种减少及推迟枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC6051a芽孢生成的分子改造方法，其特征在于，通过构建包含SEQ ID NO.1所示的调节基因的质粒并转入宿主细胞来实现，具体如下：
(1)通过PCR的方式获得调节基因，并将其构建到表达载体上得到重组载体；
(2)将重组载体在宿主细胞中进行表达获得重组菌株。
3.如权利要求2所述的一种减少及推迟枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC6051a芽孢生成的分子改造方法，其特征在于，所述表达载体为pMK4质粒；所述重组载体为pMK4-2367，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.如权利要求1所述的一种减少及推迟枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC6051a芽孢生成的分子改造方法，其特征在于，通过在宿主基因组上整合表达SEQ ID NO.1所示的调节基因来实现，具体如下：
(1)合成线性DNA片段amyLRE-2367；
(2)将amyLRE-2367在宿主细胞中表达，获得2367基因重组整合到了宿主细胞基因组中的重组菌株；
所述amyLRE-2367的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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