[发明专利]一种使用尿素纯化藻油中的GLA的方法

说明书

本发明涉及一种使用尿素纯化藻油中的GLA的方法，包括以下步骤：S1：使用所述藻油制备游离脂肪酸样品；S2：将所述游离脂肪酸样品加入尿素溶液中于0‑4℃下进行第一包合反应，过滤，去除滤渣，用石油醚从滤液中萃取脂肪酸，得到不饱和脂肪酸样品；S3：将所述不饱和脂肪酸样品加入尿素溶液中于‑40‑‑30℃下进行第二包合反应，过滤，收集滤渣；S4：从所述滤渣中提取GLA。通过使用本发明的双重尿素包合法，可从原来GLA仅占15％油脂中提取纯度高达95％以上的GLA，实现了在低成本的条件下获得高纯度的GLA的目的。

技术领域

本发明涉及微藻组分提取领域，更特别地，涉及一种使用尿素纯化藻油中的GLA的方法。

背景技术

γ-亚麻酸(gamma linolenic acid，GLA)，属于n-6系列多不饱和脂肪酸中的一种，它的化学名称为全顺-Δ6、Δ9、Δ12－十八碳三烯酸，分子式为C₁₈H₂₈O₂，为无色油状液体，在空气中极易被氧化。GLA是人体必需脂肪酸之一，它在生物体内经过复杂的代谢过程，产生多种次生代谢产物。主要形成二高-γ-亚麻酸或花生四烯酸，进而转化为前列腺素、白三烯和凝血恶烷等。GLA和其系列代谢物在免疫系统、心血管系统、生殖系统、内分泌系统中都具有重要而广泛的生理作用。在临床上，GLA可用于某些老年性疾病如糖尿病、高血脂病、动脉粥样硬化、血栓性心脑血管疾病、癌症以及胃溃疡、肥胖症、精神分裂症、特应性湿疹、风湿性关节炎、脉管炎等，还可用于合成前列腺素的前体，有调节血压和胆固醇合成的作用，并可起到控制炎症和促进细胞增殖的功效。

一般植物中亚麻酸的含量比较少，而且往往还含有比较高浓度的α-亚麻酸，该物质是GLA的同分异构体，在GLA的提纯过程中不易分离。研究发现，一些藻类例如栅藻、螺旋藻等中，GLA占总脂肪酸的含量可达15-25％，经过藻种选择和培养条件优化，GLA的含量甚至可高达30-40％，远高于高等植物中的GLA含量。因此，可从这些藻类中提取GLA用于科学研究或临床用途。

尿素包合法是从动植物油脂中富集多不饱和脂肪酸的方法之一。尿素包合法的原理是尿素分子在结晶过程中与饱和脂肪酸或单不饱和脂酸形成较稳定的晶体包合物析出,而多价不饱和脂肪酸由于双键较多,碳链弯曲,具有一定的空间构型,不易被尿素包合。采用过滤的方法除去饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸与尿素形成的包合物,就可得到较高纯度的多价不饱和脂肪酸。

尿素包合技术具有投资少，工艺简单，操作温度低，能比较完全地保留不饱和脂肪酸的营养和生理活性等优点。但是，当藻油中存在DHA、EPA等多不饱和脂肪酸时，使用尿素包合法无法分离得到高纯度的GLA。其原因在于，使用该方法无法去除DHA、EPA，而保留GLA。因此，需要一种新的方法来纯化GLA。

发明内容

我们在研究尿素包合法时，发现当包合温度降低到一定程度时，混合脂肪酸样品的GLA大量减少，而DHA和EPA的量几乎不变，这为我们纯化GLA提供了新的思路。

基于以上发现，本发明提供了一种纯化藻油中的GLA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：使用所述藻油制备游离脂肪酸样品；

S2：将所述游离脂肪酸样品加入尿素溶液中于0-4℃下进行第一包合反应，过滤，去除滤渣，用石油醚从滤液中萃取脂肪酸，得到不饱和脂肪酸样品；

S3：将所述不饱和脂肪酸样品加入尿素溶液中于-40--30℃下进行第二包合反应，过滤，收集滤渣；

S4：从所述滤渣中提取GLA。

在一个具体实施方案中，S1包括以下步骤：

S11：将所述藻油加入0.5M的KOH甲醇溶液中，得到皂化反应体系；

S12：将所述皂化反应体系于55℃下回流，至油滴消失，得到反应产物；