[发明专利]新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺

权利要求书

1.一种新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其具体步骤如下：

(1)将粗品肝素钠溶于NaCl溶液中，机械搅拌至肝素钠全部溶解，向溶液中加入碱液直至产生沉淀，静置，过滤除去不溶物，得滤液；

(2)将步骤(1)中滤液以碱液调pH至10.5-11.5，加入H₂0₂溶液，在18-35 ℃下反应10-14小时，得反应液；

(3)将步骤(2)得到的反应液升温至40-60 ℃，此后每隔2-3小时补加H₂0₂溶液，并调节pH；补料后共反应18-25 h；

(4)向步骤(3)得到的反应液中加入吸附剂，磁力搅拌，过滤除不溶物，得滤液；

(5)将步骤(4)中的滤液通过平衡好的凝胶色谱柱，收集低分子量的肝素钠洗脱液；

(6)将步骤(5)中的低分子量的肝素钠洗脱液用弱碱性离子交换树脂吸附，分别以三种浓度的NaCl溶液洗脱，收集第一种(最低)、第三种(最高)浓度的NaCl洗脱液并混合；

(7)将步骤(6)中的混合洗脱液，在磁力搅拌下降温至5-8 ℃，再用乙醇沉淀、真空干燥得产品。

2.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(1)中NaCl溶液的质量百分浓度为1.5-2.0％；NaCl溶液的用量为3-5 mL/g肝素钠粗品量；静置时间2小时。

3.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(1)和(2)的碱液均为NaOH或KOH溶液；碱液的浓度为1-1.5 mol/L。

4.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(2)和(3)中所加入的H₂0₂溶液和NaCl溶液的体积比为5：100；步骤(2)中H₂0₂溶液的浓度为5 mol/L，步骤(3)中H₂0₂溶液的浓度为3 mol/L。

5.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(3)中每次补加完H₂0₂：溶液后测定pH，使pH在7.0-7．5之间。

6.根据权利要求1所述的工新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(4)中所述的吸附剂为活性碳、皂土或硅酸盐；吸附剂的加入量为3-5 g/100mL NaCl溶液量。

7.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(5)中所述的凝胶色谱柱为Sephadex6-25，样品层为15-25％柱床体积，柱的径/高为1：5-7；以质量百分浓度4-6％NaCl溶液平衡并洗脱，流速为一个柱床体积/1．5-2小时，收集60-90mim时的洗脱液。

8.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(6)中三种浓度的NaCl溶液分别为0.1-0.3 g/L、0.4-0.6 g/L、0.7-0.9 g/L；其洗脱时间均为2.0-2.5小时，样品层为15-25％柱床体积。

9.根据权利要求1所述的新型肠粘膜提取高纯度肝素钠工艺，其特征在于：步骤(6)中所用的弱碱性离子交换树脂是D301、D315、D318或330，柱的高/径比为6-8：1。