[发明专利]一种可以将根皮苷转化为根皮素的真菌及其用途

权利要求书

1.一种用于将根皮苷转化为根皮素的真菌，其特征在于：所述真菌为长柄链格孢(Alternaria longipes )。

2.如权利要求1所述的真菌在制备根皮素中的用途。

3.一种将根皮苷转化为根皮素的方法，其特征在于，所述方法包括采用如权利要求1所述的真菌转化。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1）马铃薯液体培养基（PDA斜面培养基）及马铃薯琼脂斜面培养基（PDA斜面培养基）的配制：

选用市售新鲜马铃薯200 g，将马铃薯去皮，切制成小块状，加入适量水煮沸，30 min；然后将马铃薯水煮液纱布过滤，加水至1000 mL；称取葡萄糖 20 g，溶于马铃薯水煮液中，即得马铃薯液体培养基；马铃薯液体培养基每200ml装入一个500ml的锥形瓶中，分装好后培养基封口，于1.06 kg/cm²压力下121 ℃湿热灭菌30 min，放凉以用来制备发酵液；取马铃薯液体培养基100 mL，加入琼脂2 g，加热溶解，并且趁热分装，每5 mL至每支15 mL试管中；将分装好的培养基用橡胶塞封口，于1.06 kg/cm²压力下121 ℃湿热灭菌30 min；灭菌后趁热取出试管，倾斜放置，待培养基凝固，冷却后即成马铃薯琼脂斜面培养基，以用来接种菌株；

2）真菌的培养：

将纯化后的菌体制成10⁴CFU/ml的菌悬液，将菌悬液加入到液体培养基中，其中菌悬液与液体培养基的体积比为1：100，置于恒温振荡器上，恒温振荡器转速为160 rpm/min，28℃培养2天；

3）根皮苷的转化：

加入根皮苷溶液，使得发酵液中含根皮苷的浓度为0.1mg/ml，继续培养3d；

4）根皮素的萃取：

发酵后的发酵液用等体积的水饱和正丁醇萃取，将萃取后的正丁醇层旋干，得到转化产物浸膏。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述恒温振荡器的转速为50-300 rpm/min，优选地为100-200rpm/min，更优选地为160 rpm/min。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，培养温度为26-30℃，更优选地为28℃。

7.根据权利要求4~6中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述菌悬液的浓度为10⁴CFU/ml。

8.根据权利要求4~7中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤2）中，所述菌悬液与液体培养基的体积比为1:100。

9.根据权利要求4~8中任一项所述的方法，其特征在于，将得到的根皮素用甲醇复溶，进行HPLC检测和分析。