[发明专利]一种检测土霉素的印记传感器的制备方法

说明书

本发明属于食品安全检测领域，具体涉及一种检测土霉素的印记传感器的制备方法。制备分子印迹聚合物溶液时，以土霉素为模板分子，邻苯二胺为功能单体，在壳聚糖‑碳纳米管/纳米金粒子/金电极上电聚合一层印迹聚合物溶液后，电流响应变得很小，这是因为分子印迹膜的导电性不好，当在电极表面电聚合印迹聚合物后阻碍了电极表面的电子传递过程，当土霉素模板分子被洗脱后，在电极表面产生了很多能选择性识别土霉素的立体空穴，可以穿过这些空穴到达电极表面发生氧化还原反应，因此传感器的电流响应明显增大，传感器灵敏度也相对应大大提升，操作简单，检测效率较高。

技术领域

本发明属于食品安全检测领域，具体涉及一种检测土霉素的印记传感器的制备方法。

背景技术

牛奶富含除了膳食纤维外的人体所需要的所有营养物质，其营养之高是其他食物不可替代的。新鲜牛奶和奶制品已经成为人们（尤其是老人和儿童）生活食品中的重要组成部分。近年来，随着我国畜牧养殖业的迅速发展，奶产量大幅度提高，为了预防疾病的发生和治疗乳房炎等疾病，养殖者会在牛饲料中及饮用水中添加含有一定比例抗生素的饲料添加剂，然而，这样将不可避免地造成牛奶中抗生素的残留。土土霉素是20世纪40年代发现的四环素族成员，别名地霉素、5-羟基四环素、地灵霉素、氧四环素等，为广谱抗生素，对革兰氏阴性菌和阳性菌、立克次氏体等均有抑菌作用，主要是通过阻止氨酰tRNA与细菌30S核糖体的末端结合来抑制细菌蛋白质合成。在临床应用上土霉素被广泛用于治疗奶牛乳房炎、子宫内膜炎，并常常被用作饲料药物添加剂，用于防治肠道感染和促进畜禽生长。

土霉素具有免疫抑制影响，当长期摄入含有低剂量残留土霉素的牛奶或奶制品，土霉素在人体内不断地蓄积，当其浓度达到一定剂量时，能导致人体各种器官（胃、肠、肝脏）或组织的病变。土霉素易与人体内的钙结合，易在骨骼和牙齿中沉积，导致骨质疏松，牙齿发育不良等，最明显的残留毒性是诱导产生耐药菌株。

据我国食品质量安全的规定，土霉素残留是畜产品的必检项目之一。常见的土霉素残留检测方法主要是微生物检测法、仪器分析检测法和免疫检测法，其中微生物检测法不易筛选到特别专一敏感的菌株，易受到其他抗菌药物的影响。近年来随着高效液相色谱（HPLC）和质谱（MS）以及LC-MS等联用技术的飞速发展，仪器分析检测法很大程度上提高了分析的灵敏度和分辨率，拓宽了药物残留分析范围，但这种技术一般需要昂贵的仪器设备、大量复杂的前处理、较长的分析周期和对技术人员的技术水平有较高要求等，限制了其使用范围，不适合大量样品的快速检测和对药物残留的及时监控。而免疫检测法具有检测成本低，检测时间短，操作程序简便且可以同时检测多个样品，特异性高等特点，酶联免疫吸附测定法正逐渐广泛应用于药物的残留检测。总结来说，目前牛乳中土霉素残留的检测灵敏度低，检测操作复杂，检测效率低。因此，我们更有必要重新发明一种土霉素检测方法，以此来解决现如今存在的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题：针对目前牛乳中土霉素残留的检测灵敏度低，检测操作复杂，检测效率低的问题，提供一种检测土霉素的印记传感器的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：

1.一种检测土霉素的印记传感器的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

（1）将壳聚糖溶解于冰醋酸中，磁力搅拌，得壳聚糖溶液，将碳纳米管、质量分数为80%的硫酸溶液和质量分数为85%的硝酸溶液混合均匀，得混合溶液，将混合溶液超声振荡，得超声振荡的混合溶液，将超声振荡的混合溶液加入蒸馏水混合，离心，取上清液，将壳聚糖溶液和上清液混合，超声振荡，得壳聚糖-碳纳米管复合溶液；

（2）将氯金酸溶液与蒸馏水混合均匀，煮沸，得煮沸氯金酸混合溶液，将柠檬酸钠加入氯金酸溶液中，得纳米金粒子溶液；