[发明专利]具有自杀基因开关的靶向CD47的工程化免疫细胞

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述的CAR靶向CD47，并且所述的CAR包含细胞自杀元件和蛋白标签，所述的CAR的结构选自下组的结构：

(ii)L-scFv-H-TM-C-CD3ζ-A-K；

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

scFv为靶向CD47的抗体单链可变区序列；

H为任选的铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

K为细胞自杀元件；

A为蛋白标签；

所述的蛋白标签选自下组：绿色荧光蛋白(GFP)、NGFR截断体(NGFRt)、EGFR截断体(EGFRt)、ΔCD19、ΔCD20、或其组合，所述的细胞自杀元件选自下组：HSV-TK、iCasp9、ΔCD20、mTMPK、ΔCD19、EGFRt、或其组合；

并且所述CAR的氨基酸序列如SEQ ID NO.:3所示。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的嵌合抗原受体(CAR)。

3.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求2所述的核酸分子。

4.一种宿主细胞，其特征在于所述的宿主细胞含有权利要求3所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求2所述的核酸分子或表达权利要求1所述的CAR，所述的宿主细胞为工程化的免疫细胞，所述细胞中的PD-1基因表达是被沉默的。

5.一种制备工程化免疫细胞的方法，其特征在于，所述的工程化免疫细胞表达权利要求1所述的CAR，包括以下步骤：将权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的载体转导入T细胞或NK细胞内，从而获得所述工程化免疫细胞，并且所述的方法还包括步骤：沉默所述T细胞或NK细胞的PD1基因的表达。

6.一种权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求2所述的核酸分子、权利要求3所述的载体、或权利要求4所述的细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。