[发明专利]基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法在审
申请号: | 201711294985.3 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN107966568A | 公开(公告)日: | 2018-04-27 |
发明(设计)人: | 唐点平;任蓉蓉;蔡国能;余镇重 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 ii 邻菲罗啉 体系 脂质体 包裹 葡萄糖 免疫 分析 方法 | ||
1.基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征是,所述方法包括如下步骤:
(1)制备葡萄糖负载的脂质体;
(2)通过交联剂将链霉素-牛血清白蛋白与葡萄糖负载的脂质体交联制成信标;
(3)将抗体固载在微孔板上,加入待测样品与信标混合孵育;用清洗缓冲溶液除去未参与反应的待测样品和信标;
(4)加入曲拉通X-100溶解脂质体;然后加入葡萄糖氧化酶溶液、氯化亚铁溶液混合孵育后,再加入邻菲罗啉显色剂显色,手机记录下检测液的颜色变化用于可视化半定量检测,紫外可见分光光度计进行定量检测。
2.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征是,步骤(1)所述的葡萄糖负载的脂质体是通过逆向蒸发法得到的,所述的脂质体粒径为199 ± 18 nm,溶液散发出淡蓝色特征乳光。
3.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征是,步骤(1)所述的葡萄糖负载的脂质体所用葡萄糖的量为10 mL,浓度为5 mM。
4.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征是,步骤(2)所述的信标的制备所用戊二醛的量为5.0 mL,浓度为25 wt%。
5.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述曲拉通X-100的浓度为10 mg ml-1,用量为100 μL。
6.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述葡萄糖氧化酶的浓度为1 mg ml-1,用量为20 μL。
7.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述氯化亚铁的浓度为5 mM,用量为100 μL。
8.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述邻菲罗啉的浓度为15 mM,用量为100 μL。
9.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述孵育时间为30分钟、温度为37°C。
10.根据权利要求1所述的基于铁(II)与邻菲罗啉体系和脂质体包裹葡萄糖的免疫分析方法,其特征在于:步骤(4)所述邻菲罗啉加入显色的时间为50秒。
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