[发明专利]一种利用液体培养基生产蛹虫草子实体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用液体培养基生产蛹虫草子实体的方法，具体属于蛹虫草生产技术领域。

背景技术

蛹虫草（Cordyceps militaris）又称北冬虫夏草，属真菌子囊菌纲麦角菌科，可由其真菌子座与夜蛾科昆虫蛹形成复合体。近年研究证明蛹虫草除了富含蛋白质、氨基酸、维生素及钙、铁、锰、锌、硒等微量元素外，还含有虫草素（cordycepin）、虫草酸（cordycepic acid）、虫草多糖和SOD等生物活性物质，具有扩张血管、镇静、抗菌、降血压等功效，在许多方面其功效可以媲美甚至超过冬虫夏草。卫生部发布09年3号公告批准蛹虫草为新资源食品。

目前蛹虫草的人工栽培培养基主要的原料为大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黄豆等，传统的生产方法中培养基都是固体培养基。而采用固体培养基的方法栽培存在一定的不足：（1）传统方法蛹虫草子实体生产过程中对培养基的利用有限，将会有大量的粮食浪费；（2）传统方法中，象马铃薯等薯类不方便制备成固体培养基，一般不会直接用于蛹虫草的生产中；（3）蛹虫草生产中只收获了它的子实体，而培养基中的菌丝体由于不方便采收，一般都弃而不用，生物利用率不高，造成不小的浪费；（4）操作上更繁琐。

针对上述固体培养基方法的不足，本发明提出一种利用液体培养基生产蛹虫草子实体的方法，在液体培养过程中菌丝体充分接触养分，吸收营养充分，可以最大限度的利用营养物质，可最大限度转化利用，省工省时，适合规模化生产。

发明内容

本发明旨在建立一个利用含淀粉的粮食制备的液体培养基以及粮食加工以后含淀粉的废液作为液体培养基质，充分利用粮食资源深加工和生产具有食药用价值蛹虫草的一种方法。

本发明一种利用液体培养基生产蛹虫草子实体的方法包括以下步骤：

步骤1：

液体培养基配制时，其中干淀粉的含量控制在2wt%～8wt%之间，其他成分的含量控制在：维生素B₁为10～100mg/L、KH₂PO₄为0.1% wt～0.3 % wt、MgSO₄为0.1% wt～0.3% wt、蛋白胨或奶粉为0.5% wt～1.5 % wt。

步骤2：

将步骤1配制好的液体培养基煮沸后过滤，再装瓶灭菌。

步骤3：

按1%～5%的体积比，将蛹虫草液体菌种加入到步骤2灭菌后的液体培养基中，在25℃、转速180rmp下进行摇菌培养2.5～4天。

步骤4：

将步骤3培养好的蛹虫草菌丝体在光照下进行20℃的恒温静置培养，促使菌丝体聚集在液体培养基的表面而形成菌丝块。

步骤5：

步骤4液体培养基的菌丝块在20℃继续光照静置培养一个星期后形成子实体；维持培养6～8周后，将生长出来的蛹虫草子实体，连同菌丝块一并收集利用。

所述的步骤1中的液体培养基是富含淀粉的粮食或粮食加工以后含淀粉的废液。

本发明有益效果：

（1）可以充分利用粮食资源，包括马铃薯等薯类作物，甚至可以利用粮食加工过程中的废弃下脚料，由此可大大的降低原料的成本；（2）液体培养过程中，无论是在初期的摇菌培养，还是在随后的静置培养，菌丝体充分接触养分，吸收营养充分，可以最大限度的利用营养物质，培养基中的营养物质浪费少，达到较高的产出比；（3）生物利用率大大提高，生长出来的蛹虫草子实体可以连同下方的菌丝块一并收获，菌丝块中的营养成份和活性物质含量仍然很高，这样可达到最大限度转化利用的目的；（4）利用该方法省工省时，适合规模化生产。

具体实施方式

实施例1

马铃薯液体培养基生产蛹虫草子实体

步骤1.液体培养基的制备：液体培养基配制以每升200～300克鲜马铃薯为宜，同时可加入10～100mg/L维生素B₁，0.1～0.3% KH₂PO₄，0.1～0.3% MgSO₄，0.5～1.5%的蛋白胨或奶粉做为培养基的氮源。培养基煮沸加热以后过滤去除大颗粒的杂质，高温高压灭菌。

步骤2.蛹虫草液体菌种的培养：预先将蛹草菌种接种在PDA平板培养基上，进行活化培养3天。挑取蛹虫草菌丝体接种在有液体培养基的三角瓶中培养5天制备成蛹虫草的菌种。