[发明专利]一种坦布苏病毒E蛋白受体结合域的应用

说明书

本发明公开了一种坦布苏病毒E蛋白受体结合域的应用。该受体结合域氨基酸序列选自SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明受体结合域通过与坦布苏病毒受体HSPA9特异性结合，阻断病毒粒子与细胞吸附，从而抑制坦布苏病毒感染DF‑1细胞。该结合域对宿主本身不产生影响和副作用，使得该受体结合域具有很高的特异性和更好的应用前景。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及一种坦布苏病毒E蛋白受体结合域的应用。

背景技术

坦布苏病毒属于黄病毒科、黄病毒属，可引起以食欲急剧减退、产蛋量骤降为主要特征的 坦布苏病毒病。坦布苏病毒暴发以来已连年在我国多省大面积流行，并且感染的宿主谱还在不 断扩大，蛋鸭、种鸭、雏鸭、蛋鹅、种鹅及蛋鸡等均出现了坦布苏病毒感染的病例报道(Liu M, Chen S,Chen Y,et al.Adapted Tembusu-like virus in chickens andgeese in China.J Clin Microbiol. 2012,50(8):2807-2809.)，已成为危害我国鸭鹅养殖业的重要疫病之一。(Huang X,Han K,Zhao D,et al.Identification and molecularcharacterization of a novel flavivirus isolated from geese in China.Res VetSci.2013,94,774-780；Su J,Li S,Hu X,et al.Duck egg-drop syndrome caused by BYDvirus,a new Tembusu-related flavivirus.PLoS One.2011,6,e18106.)。该病的发病率可高 达100％，死亡率在5％～10％之间(Tang Y,Diao Y,Gao X,et al.Analysis of theComplete Genome of Tembusu Virus,a Flavivirus Isolated from Ducks inChina.Transbound Emerg Dis,2012, 59(4):336-343.)。

坦布苏病毒病发病急，传播迅速，流行范围广。虽然已有坦布苏灭活疫苗和弱毒疫苗，但 在有些情况下，抗体在病毒感染过程中却发挥相反的作用。它们协助黄病毒属病毒进入靶细胞， 提高感染率，这一现象就是抗体依赖性增强作用(ADE)。这使得采用疫苗防治坦布苏病毒时 常常难以奏效。

坦布苏病毒属于黄病毒家族成员，该属病毒主要包括几种重要的人类病原体，包括登革病 毒、西尼罗病毒和乙型脑炎病毒等。目前为止，该属病毒没有感染的特异性疗法，物治疗效果 并不理想，临床上较难控制。

黄病毒属病毒以E蛋白作为吸附蛋白，通过E蛋白二聚体与细胞表面的HS、DC-SIGN、 Hsp70/Hsp90、CD14、GRP78/BiP等受体分子结合，使病毒粒子吸附靶细胞。病毒E蛋白与宿 主细胞受体结合后，启动E蛋白构象变化，折叠形成三聚体结构，拉近病毒囊膜与细胞膜距 离，引发两膜融合，随后病毒基因组释放到宿主细胞内感染宿主(Smit JM,MoeskerB, Rodenhuis-Zybert I,et al.Flavivirus cell entry and membranefusion.Viruses,2011,3(2): 160-171.)。以上述机制为基础，筛选E蛋白中参与受体结合的核心结构域，可在病毒E蛋白 吸附受体过程中特异性竞争性结合受体，阻断病毒粒子与受体的结合，达到抑制病毒感染的目 的。

坦布苏病毒病属于新发传染病，相关研究尚属空白，目前坦布苏病毒感染细胞机制尚未明 确，也没有有关受体结合域的报道。因此，鉴定坦布苏病毒E蛋白受体结合域将有助于了解坦 布苏病毒的入胞机制，并应用于坦布苏病毒病的防控。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种新的坦布苏病毒受体结合域的应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：