[发明专利]一种从杜仲叶中分步提取总黄酮和多糖的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分的提取技术领域，具体涉及一种分步提取杜仲叶中的总黄酮和多糖的方法。

背景技术

杜仲( Eucommia ulmoides Oliver)为杜仲科(Eucommiaceae)植物，本科仅属1种，是仅存于我国的第三纪孑遗植物，属我国珍稀濒危第二类保护树种。杜仲是一种很神奇的植物，全身除木材外，皮、叶、果、枝条都含有丰富的次生代谢物，是一种多天然活性物质、多功能的植物。杜仲皮、 叶、 花、 果实等所含物质相似，迄今发现的化学成分多达138种，主要为木脂素类、苯丙素类、环烯醚萜类、黄酮类化合物，还有多糖、酚类、三萜类、甾类、有机酸；此外，还含有丰富的营养成分，如氨基酸、脂肪和微量元素等。现代研究表明，杜仲的多种药效成分和营养成分，主要为黄酮和多糖类等，如杜仲多糖、槲皮素、山柰酚、芦丁、杜仲醇、杜仲胶、杜仲苷、松脂醇二葡萄糖苷和维生素等，有良好的降压、利尿、保肝、抗肿瘤、抗菌、抗衰老和中枢镇静等多种药理作用，因此近年来在临床上的应用越来越广泛，临床需求量显著增加。

杜仲叶为杜仲科植物杜仲的干燥叶，别名丝棉树、丝棉皮、玉丝皮，与杜仲皮有相同的有效成分和药理作用，完全可以以叶代皮入药。可在夏、秋二季枝叶茂盛时采收，晒干或低温烘干。黄酮和多糖的提取方法有醇提法、超声提取法、大孔树脂吸附分离法、微波提取法、半仿生法和酶法，其中以乙醇作为溶剂提取总黄酮，以水作为溶剂提取多糖的工艺最为常见。此种方法成本低廉，有效成分提取相对完全，适合大规模工业化生产。中国专利CN 101461835 B“杜仲黄酮多频组合超声浸取办法”介绍了杜仲黄酮多频组合超声浸取方法，是将杜仲和乙醇水溶液的混合物，用多频复合、交变超声浸取黄酮的方法，间歇或连续操作，比单频超声浸取效果相对要好。中国专利CN 101914472 A“一种杜仲叶提取物及其制备方法和应用”介绍了一种关于杜仲叶提取物的工艺研究，是将杜仲叶用水煎煮并过滤，调整滤液的pH值5.5-7.5，得到杜仲叶提取物，并将其应用于乳酸菌发酵培养促进剂，以显著提高发酵液含活性菌数量，效果显著。中国专利CN 104688801 A“一种复合酶结合超声自杜仲叶提取杜仲黄酮的生产工艺”介绍了一种复合酶结合超声对杜仲叶中黄酮进行提取的工艺方法，是将杜仲叶粉碎过筛，并向粉末中加3-5倍水浸泡，同时加入纤维素酶和果胶酶，调节pH值使其酶解，然后煮沸使酶失活，再向其中加入乙醇进行超声浸提，提取液过滤、浓缩，并采用大孔树脂分离、洗脱、浓缩得到总黄酮纯品。上述专利采用超声、浸泡等不同工艺方法提取杜仲中的黄酮，对设备要求较高，对杜仲有效成分提取单一、不够充分，不能对活性成分达到最大限度的提取，所述方法也不易实现大规模生产。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种低成本、高效率、节能环保地从杜仲叶中分步获得总黄酮、多糖等活性成分的方法，实现杜仲叶活性组分的充分提取利用。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种从杜仲叶中分步提取总黄酮和多糖的方法，步骤如下：

（1）将杜仲叶干燥、粉碎、过筛，加入乙醇水溶液，采用磁力搅拌、加热回流或者微波加热的方式提取总黄酮，提取结束后，将混合料液冷却，采用离心或抽滤进行液-固分离，得到杜仲叶一次固体残渣和初提液，分析初提液中的总黄酮浓度，计算总黄酮纯度和得率；

（2）将步骤（1）分离得到的杜仲叶一次固体残渣干燥后，加入去离子水中预浸泡，然后采用超声或微波提取多糖，提取结束后，将提取液离心或抽滤，分离得到杜仲叶二次固体残渣和上清液，分析上清液中的多糖浓度，计算多糖纯度和得率。

（3）将步骤（2）分离得到的杜仲叶二次固体残渣用来做饲料或肥料。

所述步骤（1）中的杜仲叶干燥、粉碎后，过20-100目筛。

所述步骤（1）中乙醇水溶液的体积分数为10-90%，杜仲叶与乙醇水溶液的料液比为1:8-1:40 g/mL。

所述步骤（1）中采用磁力搅拌、加热回流提取总黄酮时的提取温度为40-90℃，回流提取时间为30-360 min。

所述步骤（1）中采用微波加热方式提取总黄酮时的微波温度为40-80℃，微波功率为100-1000W，微波提取时间为1-30 min。

所述步骤（1）中，采用硝酸铝法分析初提液中总黄酮浓度。

所述步骤（2）中的杜仲叶一次固体残渣，置于干燥箱干燥，所述的干燥温度为40-90℃；所述的杜仲叶一次固体残渣与去离子水的料液比为1:8-1:40 g/ml，预浸泡时间为0-240 min.