[发明专利]一种蚬木组培苗的繁育方法

权利要求书

1.一种蚬木组培苗的繁育方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）外植体的采摘：选择无病虫害危害，生长健壮，半木质化带有3~7个腋芽的嫩枝，去除叶片，用消毒剪剪成1~2.5cm小段，每小段带有至少一个腋芽，将其作为外植体；

（2）消毒：使用纯净水将外植体反复冲洗3~4次后，先用次氯酸钠溶液消毒5~10s，再用升汞溶液消毒10~20min后，用消过毒的滤纸片吸干，备用；

（3）预培养：将外植体斜插于愈伤组织培养基中培养，在温度23~25℃，湿度控制70~80%，暗培养10~15天，获得愈伤组织；

（4）初代培养：选取没有污染的愈伤组织，转入初代培养基上进行诱芽培养，培养25~30天；培养条件：温度28±2℃，光照强度1600~1800lux，每天光照8~12h；待有腋芽不断生成时结束；

（5）继代培养：选取腋芽长1.5~2.5cm的初代芽苗，转入继代培养基中培养，培养条件：温度28±2℃，光照强度1200~1500lux，每天光照12~15h；培养35~38天，待有2~3个叶片出现时结束；

（6）生根培养：将带叶片的小苗再置于生根培养基中，培养条件：温度25±2℃，光照强度2000~2400lux，每天光照14~15h；20天后，不断有根长出，待根长约5~8cm时准备驯化；

（7）驯化处理：将生根培养结束的带根蚬木苗转移至室外可控条件下，光照强度为1400~1600lux，每天光照6~8h，湿度降低为50~65%，每天接受1~2h冷风直吹处理，驯化处理15天后，准备移栽；

（8）将驯化苗移栽至苗圃、山坡或温棚中。

2.根据权利要求1所述的蚬木组培苗的繁育方法，其特征在于：步骤（3）所述愈伤组织培养基的配方为MS+N6-苄基腺嘌呤0.3~0.5mg/L+纳米碳0.8~1.5mg/L+吡唑醚菌酯0.05~0.08mg/L+维生素C 2.0 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂4.0g/L，pH 6.8~7.0。

3.根据权利要求1所述的蚬木组培苗的繁育方法，其特征在于：步骤（4）所述初代培养基配方为MS+蔗糖4.0g/L +N6-苄基嘌呤0.3~0.5mg/L +萘乙酸0.3~0.8mg/L+γ-聚谷氨酸0.03~0.10mg/L+维生素B1~3mg/L+硼砂1.5~1.8mg/L+吡唑醚菌酯0.05~0.08mg/L +琼脂5g/L，pH 6.4~6.7。

4.根据权利要求1所述的蚬木组培苗的繁育方法，其特征在于：步骤（5）所述继代培养基的配方为1/2MS+蔗糖2~8g/L +萘乙酸0.8~1.0mg/L+吡唑醚菌酯0.05~0.08mg/L+硫酸锰0.5~1.5g/L+琼脂6~8g/L，pH6.2~6.3。

5.根据权利要求1所述的蚬木组培苗的繁育方法，其特征在于：步骤(6)所述的生根培养基配方为：MS+蔗糖3~6g/L+吲哚乙酸0.5~1.4mg/L +萘乙酸0.5~1.3mg/L + IBA 0.11~0.15mg/L+GA₃0.25~0.5mg/L+γ-聚谷氨酸0.5~1.5g/L+琼脂6~8g/L，pH6.6~6.8。