[发明专利]一种分解纤维素的酵素生产方法

权利要求书

1.一种分解纤维素的酵素生产方法，其特征在于：所述的生产方法包括用于分解的纤维素酵母菌、FM22培养基、微量元素PMT4、消泡剂、50%甘油、12：1甲醇、0.1%的吐温-80，所述生产方法经重组菌株高密度发酵及酵素合成诱导制成。

2.根据权利要求1所述的分解纤维素的酵素生产方法，其特征在于：所述重组菌株高密度发酵，利用发酵罐，对纤维素酵母菌进行液体深层发酵，将5-10mL重组酵母菌保存液接种至含有100mLYPD液体培养基的500mL锥取形瓶中，适宜温度28-30℃，以每分钟转速280，培养至酶标仪测定600nm处吸光度值约为6，形成种子液；对发酵罐进行灭菌，降温至28-30℃，加入FM22培养基、微量元素PMT4、消泡剂及已准备好的种子液，控制培养液溶解氧含量为30-35%，每分钟转速600，培养24h；以150mL/h流速流加50% 甘油，持续4h，每0.5h观察培养液；溶解氧含量峰值，手动控制培养液溶解氧含量为30-35%，添加甘油过程中应持续缓慢，以确保甘油不积累。

3.根据权利要求1所述的分解纤维素的酵素生产方法，其特征在于：所述酵素合成诱导，甘油流尽时，以3mL/h流速流加12：1甲醇和微量元素PMT4，并加入0.1%的吐温-80，控制每分钟转速800，培养液溶解氧含量30-35%，适宜温度28-30℃，进行发酵；发酵期间，每隔12h取样。