[发明专利]一种鉴别荔枝蜜的方法

说明书

本发明公开了一种鉴别荔枝蜜的方法，首先通过构建荔枝蜜、荆条蜜、油菜蜜的HPLC−DAD指纹图谱，确定荔枝蜜的特征标志物。然后依托制备型液相色谱，对确定的特征标志物进行分离纯化，分别得到纯度较高的2种特征标志物。最后使用四级杆/飞行时间质谱仪分析特征标志物的分子信息，最终确定2种特征标志物的分子量为264，分子式为C₁₅H₂₀O₄，推测为同分异构体。本发明设计合理，所选分析仪器灵敏度高，分析速度快，分离效能高，可行性强，为荔枝蜜的真伪鉴别和质量控制提供依据。

技术领域

本发明涉及一种鉴别荔枝蜜的方法，属于食品科学领域。

背景技术

蜂蜜(honey)是一种由蜜蜂采集植物的花蜜或其分泌物后，在体内经自身的酶和特殊物质的加工酿造而成的天然物质。蜂蜜中的主要成分是葡萄糖、果糖和水，其质量总和达到蜂蜜质量的80%以上。此外，蜂蜜中还含有丰富的活性物质，如酚酸类、黄酮类、生物碱等。这些活性物质含量的高低与蜂蜜的生物活性，包括抗氧化、抗肿瘤、抑菌消炎、保护心脑血管等息息相关。蜂蜜的花源不同，其活性成分的种类和含量也会有所不同，因此，可根据蜂蜜的特征标志物鉴别蜂蜜种类。

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)是一种原产我国南方的蜜源植物，因其花期长，泌蜜丰富、蜜质优良，为我国热带和亚热带主要蜜源植物之一。荔枝花期因品种和分布的不同存在差异，如早熟种的花期在2月中旬，中熟种3月上旬，而晚熟种3月下旬或4月上旬，花期30天左右。荔枝蜜是一种带浅琥珀色泽，芳香浓郁，味甘甜的上等蜂蜜。有研究报道，荔枝蜜具有提高人体免疫力，抗衰老，抗肿瘤和美容的功效，因此，深受消费者喜爱。然而荔枝蜜由于花粉不足，花期多雨，大小年明显，产量并不稳定，市场售价相对较高。在此背景下，一些劣质蜜乃至掺假蜜的出现，使得市场上的荔枝蜜质量良莠不齐，严重损害消费者利益。因而，荔枝蜜特征标志物的鉴定是荔枝蜜真伪鉴别和质量控制的关键。

发明内容

本发明目的在于提供一种鉴别荔枝蜜的方法，该方法基于HPLC−DAD建立荔枝蜜的指纹图谱，识别其特征化合物并使用分离纯化技术得到该特征物质，通过Q/TOF-MS对该特征物质的分子量进行鉴定，为控制荔枝蜜质量提供依据。

本发明的目的通过以下方案实现：

一种鉴别荔枝蜜的方法，包括以下步骤：

（1）选取荔枝蜜、荆条蜜、油菜蜜各10批次样品，充分溶解于pH为2的盐酸水溶液中，然后将样品溶液注入装XAD−2树脂的层析柱中，分别用pH为2的盐酸水溶液、蒸馏水充分淋洗以去除其中的极性物质，最后进行甲醇洗脱；将洗脱液减压真空浓缩得到粗提化合物，用色谱纯甲醇溶解定容后得到供试样品溶液，4℃密封保存；

（2）利用HPLC−DAD对荔枝蜜、荆条蜜、油菜蜜的各10批次样品进行分析，所得数据经指纹图谱软件分析处理后，得到荔枝蜜、荆条蜜、油菜蜜样品的指纹图谱；

（3）分析荔枝蜜、荆条蜜、油菜蜜的指纹图谱，确定荔枝蜜特征峰的数量、位置及其紫外最大吸收波长，最终选定2个特征峰，其保留时间分别为56.59 min和60.13 min，紫外最大吸收波长分别为264.2 nm和262.9 nm；

（4）对选定的荔枝蜜特征峰化合物进行分离、纯化；按步骤（1）所描述的方法得到大量的粗提物，然后依托制备型液相色谱仪，用不同的C18分离柱进行反复多次的分离，得到这2种特征化合物；

（5）使用Q/TOF-MS分析特征化合物的分子信息，最终确定这2种特征化合物的分子式为C₁₅H₂₀O₄，分子量均为264，推测其为同分异构体。