[发明专利]一种同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法

说明书

本发明涉及一种同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法，属于保健酒功能成分研究领域。包括采用液质联用法通过负离子扫描工作模式对椰岛鹿龟酒中的活性成分进行定性分析，然后采用外标法进行定量分析。该方法前处理步骤简单、精密度高，定量限低、稳定性好，能够快速测定椰岛鹿龟酒样品中甘草酸、肌苷、大黄酸和绿原酸的含量，可用于椰岛鹿龟酒及相似配方的中药材混合提取液或配制酒中成分的同时快速测定。

技术领域

本发明涉及保健酒功能成分研究领域，且特别涉及一种同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法。

背景技术

椰岛鹿龟酒源于古方龟鹿二仙胶和八珍汤的加减方，是宝贵的非物质文化遗产，它结合了二者的优点，并在此基础上进行了配方优化，经功能学动物试验证明具有抗疲劳和免疫调节的保健作用。鹿龟酒组方(动植物)药材多达十几种，具有120种以上的活性化合物，其中甘草酸、肌苷、大黄酸、绿原酸具有重要的生理活性，共同组建了鹿龟酒强大的保健功能体系。如甘草酸对肉瘤、癌细胞生长有抑制作用，尤其对艾滋病有明显的抑制率；肌苷具有活化肝功能，加速肝细胞的修复，有增强白细胞增生的作用。大黄酸具有抗肿瘤活性、抗菌、免疫抑制、降压、利尿、泻下、抗炎、治疗糖尿病肾病等作用；绿原酸具有抗菌、抗病毒的作用。

椰岛鹿龟酒中活性成分源于配方中多味中药材，据文献查阅中药标志性成分大多采用高效液相色谱法，且常用到二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器，由于各成分的检测波长、极性的不同，通常需要分别建立独立的分离方法，往往耗时耗力。另一方面椰岛鹿龟酒营养价值一直以口碑宣传为主，未曾通过科学手段深入挖掘其功能活性成分。

因此需要建立一种快捷的，精密度高的可同时检测鹿龟酒中多种活性成分的分析方法，让椰岛鹿龟酒的营养价值得以完美诠释与表达。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法，该方法前处理步骤简单、精密度高，定量限低、稳定性好，能够快速测定鹿龟酒样品中甘草酸、肌苷、大黄酸和绿原酸的含量，可用于椰岛鹿龟酒及相似配方的中药材混合提取液或配制酒中成分的同时快速测定。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的：

本发明提出一种同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法，其包括以下步骤：

首先采用液质联用法通过负离子扫描工作模式对椰岛鹿龟酒中的活性成分进行定性分析，然后采用外标法对活性成分进行定量分析。

液质联用法中的色谱条件为：色谱柱为Procell 120 Columns SB-AQ2.7Poroshell 120 SB-Aq 2.7μm，2.1*100mm。

流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A为氟化铵水溶液，流动相B为甲醇。

洗脱时间及洗脱时间内流动相B的体积含量如下：0-1min，0-2％；1-2min，2-30％；2-5min，30-60％；5-10min，60-95％；10-12min，95-95％；12-12.5min，95-2％。

液质联用法中的质谱条件为：电喷雾离子源工作模式为负离子扫描；雾化器压力为30-40psi；毛细管电压为3800-4200V；碰撞电压为800-1200V。

优选地，雾化器的压力为35psi；毛细管电压为4000V；碰撞电压为1000V。

本发明实施例的同时快速测定椰岛鹿龟酒中4种功能活性成分的检测方法的有益效果是：

1、采用负离子扫描工作模式测定甘草酸、肌苷、大黄酸、绿原酸，该方法前处理简便、样品无损失、检测限低，并且回收率高、稳定性好；