[发明专利]一种郁闭林中火力楠外植体的消毒方法

权利要求书

1.一种郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1选取外植体采集时间：在夏、秋两季顶芽抽包，苞芽长到3～5cm，苞片未打开前采集枝条做外植体；

S2选择外植体的采集长度：选择外植体含抽苞顶芽的茎段10～15cm；

S3外植体的初步清洗：置于洗盘中，打开流动的自来水，一边用手轻抹外植体上的绒毛，一边清洗，直到看不见绒毛为度，然后干毛巾吸去外植体上的水分，备修剪消毒用；

S4外植体消毒的合适长度选取：取步骤S3清洗出来的外植体，筛选修剪外植体，具体包括如下步骤：

A1.去除有病虫伤害或运输受伤的外植体；

A2.苞芽长度超过4cm，从顶向下剪除过高部分，保留苞芽顶部4cm以下，苞芽基部2～3cm；

A3.除去外植体枝条的基部老化部分，仅保留新抽的茎段；

A4.外植体上下修剪后长度为6～7cm的带顶芽莖段待消毒；

S5外植体的消毒，其方法具体包括如下步骤：

B1.步骤S4修剪好的外植体，放入200ml的果酱瓶中，外植体基部朝下，顶芽朝上；

B2.将0.1％的升汞倒入果酱瓶，浸没过外植体，再将果酱瓶移进超声波清洗机，超声波清洗机水槽中的自来水线，浸没过果酱瓶内的升汞线，开动超声波清洗机，记时开始；

B3.在SONICS状态下3～8min，在DEGAS状态下3～8min清洗消毒外植体；

S6顶芽包片的剥离：在超净工作台上，用无菌刀片，从顶芽包片基部向上慢慢削剥苞片，直到可以完全打开苞片，去除苞片，并去除已经长大的叶片，轻刮苞片下面的茎毛；

S7接种外植体的剪取：在超净工作台上，将经过S6处理的外植体，以苞芽基部为中心，苞芽长1.5～2.0cm，基部长0.8～1.5cm，总长为2.5～3.0cm为标准，剪取接种外植体。

2.根据权利要求1所述的郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，在步骤S1和S2中，在夏、秋两季顶芽开始抽包，苞芽长到3～5cm，苞片未打开前采取10～15cm外植体。

3.根据权利要求1所述郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，在步骤S3中，在流水中用手轻抹外植体绒毛至净，并剪去外植体苞芽过长部分。

4.根据权利要求1所述郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，在步骤S4中，保留苞芽顶部4cm以下，苞芽基部2～3cm；外植体总长为6～7cm的消毒顶芽莖段。

5.根据权利要求1所述郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，在步骤S5中，将外植体放入果酱瓶，再倒入0.1％的升汞，浸没过外植体，水槽中的自来水线，浸没过果酱瓶内的升汞线，在SONICS状态下3～8min，在DEGAS状态下3～8min清洗消毒外植体。

6.根据权利要求1所述郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，在步骤S7中，并将外植体剪取为苞芽长1.5～2.0cm，基部长0.8～1.5cm，总长为2.5～3.0cm接种茎段。