[发明专利]新型糖基转移酶及其应用有效
| 申请号： | 201711250803.2 | 申请日： | 2017-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN109868265B | 公开（公告）日： | 2023-04-25 |
| 发明（设计）人： | 王勇;孙雨伟;陈卓;李建华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12P33/20 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200032 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新型 糖基转移酶 及其 应用 | ||
1.分离的多肽，其特征在于，所述多肽选自：
(a) 氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示的多肽；
(b) (a)的保守性变异多肽；所述的保守性变异多肽为在(a)多肽的N或C末端添加标签，或在其N末端添加信号肽后形成的多肽。
2.分离的多核苷酸，其特征在于，它编码权利要求1所述的多肽。
3.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.一种用于发酵生产甜菊糖苷类化合物的遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，该宿主细胞中含有权利要求3所述的载体，或其基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸；该宿主细胞为真菌细胞。
5.一种用于发酵生产甜菊糖苷类化合物的遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，该宿主细胞中含有权利要求3所述的载体，或其基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸；该宿主细胞为细菌细胞。
6.一种权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：培养权利要求4或5所述的宿主细胞；收集含有权利要求1所述的多肽的培养物。
7.权利要求1所述的多肽的用途，用于在具有母核(I)结构的化合物上转移上一个糖基，形成如式(II)结构的化合物；
；
(I) (II)
其中，R独立地选自：H，OH，O-β-D-葡萄糖基，O-β-D-葡萄糖基-(2→1)-β-D-葡萄糖基。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的具有母核(I)结构的化合物包括：对映-贝壳杉烯酸，甜菊醇，甜菊醇单糖苷，甜菊醇双糖苷。
9.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的式(II)结构的化合物包括：对映-贝壳杉烯酸-19-O-葡萄糖酯，甜菊醇-19-O-葡萄糖酯，甜叶悬钩子苷，甜菊苷。
10.如权利要求7～9任一所述的用途，其特征在于，所述的糖基的供体是含有糖基的化合物。
11.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述的供体包括：UDP-葡萄糖，UDP-鼠李糖，UDP-木糖。
12.一种用于糖基转移的组合物，其特征在于，它含有权利要求1任一所述的多肽或含有权利要求4或5所述的宿主细胞。
13.一种在具有母核(I)结构的化合物上转移上一个糖基的方法，其特征在于，所述方法包括：以多肽或表达该多肽的宿主细胞将糖基转移到具有母核(I)结构的化合物，从而形成如式(II)结构的化合物；
；
(I) (II)
其中，R独立地选自：H，OH，O-β-D-葡萄糖基，O-β-D-葡萄糖基-(2→1)-β-D-葡萄糖基；
其中，所述的多肽为权利要求1所述的多肽。
14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述的糖基的供体是含有糖基的化合物。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述的供体包括：UDP-葡萄糖，UDP-鼠李糖，UDP-木糖。
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