[发明专利]一种高灵芝多糖含量的灵芝菌丝发酵液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及真菌发酵领域，具体而言，涉及一种高灵芝多糖含量的灵芝菌丝发酵液及其制备方法。

背景技术

灵芝Ganoderma lucidum[(Leyss.ex.Fr.)Karst]属于担子菌纲、多孔菌科、灵芝属高等真菌。灵芝在我国已有上千年的历史，早在《神农本草经》中就有记载，灵芝固本培元,久食不老，轻身延年。《本草纲目》将其列为上品药物，指出赤芝“苦，平，无毒，主治胸中结，益心气，补中，增智慧，不忘”，紫芝“无毒，好颜色，治虚劳，治痔”。

灵芝中所含的活性物质主要有：多糖类、三萜类、核苷类、甾醇类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、微量元素、脂肪酸等，其中，灵芝多糖是灵芝主要的生物活性成分。灵芝多糖有多方面的药理活性：能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基，提高机体细胞膜的封闭度，抗放射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质的能力，延长寿命等。

自然界中野生灵芝十分稀少，且其中灵芝多糖含量不够高，使开发灵芝产品的成本过高。其次人工栽培灵芝周期长、提取出多糖的含量较低，产品质量易受环境气候及虫害的影响，不方便推广。目前灵芝多糖等灵芝活性物质生产主要依靠人工栽培子实体为原料以提取的方法获取。公开号CN105294875A，公开日为2016年2月3日的申请文件公开了一种从灵芝子实体中提取灵芝多糖的方法，包括以下步骤：灵芝粉碎，亚氯酸钠-冰醋酸体系氧化处理，残渣加水超声提取，上清液经醇沉离心得粗多糖。该发明利用亚氯酸钠-冰醋酸体系来消解灵芝子实体中的木质素和纤维素，使其中的多糖更多的释放出来并与超声辅助萃取有机结合来提取多糖。该方法灵芝多糖的收率为13.51％。但是该方法需要得到灵芝子实体，生产周期长，成本较高。同时需要先提取林芝粗多糖，再提纯，步骤繁琐，而且会产生很多副产品，易污染环境。

公开号CN106431699A，公开日为2017年2月22日的申请文件公开了提高灵芝多糖含量的培养基，包括以下步骤：核桃壳一份，大豆秸秆一份，米糠一份，玉米粉一份，豆粕一份，中药添加剂一份，蔗糖一份，石膏粉一份，轻质碳酸钙一份；所述的中药添加剂由以下重量份的原料制成：蒲黄一份，棕搁一份，前胡一份，首乌藤一份，瓜蒂一份。该方法配制培养基的方法步骤繁琐，其培养基为培养菌丝体的培养基，取材太不方便，不易工业化生产。

公开号CN105017441A，公开日为2017年2月22日的申请文件公开了一种灵芝多糖的提取方法，包括以下步骤：将灵芝乙醇提取，取滤渣备用；将滤渣水提，收集滤液备用；将滤液浓缩浸膏，乙醇沉淀，离心得沉淀；将沉淀依次无水乙醇、丙酮分别洗涤，将洗涤后的沉淀用蒸馏水溶解，过截留分子量为5万的中空纤维膜，收集浓缩液，然后将浓缩液过截留分子量为8万的中空纤维膜，收集透过液离心，过滤，取滤液备用往滤液加入活性炭脱色，过滤，取滤液喷雾干燥，即为灵芝多糖。其得到的多糖含量为92.3％。该方法步骤复杂，材料容易污染环境，需要得到灵芝子实体，需要时间长，成本高。

公开号CN103073651A，公开日为2017年2月22日的申请文件公开了一种灵芝多糖的提取方法，包括以下步骤：本发明公开一种灵芝多糖方法及其应用。本发明采用超声波结合酶法提取灵芝多糖，灵芝粉碎后，通过提取、超滤、浓缩和乙醇沉淀分离获得灵芝多糖。灵芝多糖提取率为3.14-4.21％。该方法同样需要得到灵芝子实体，需要时间长，步骤复杂，不易规模化生产。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高灵芝多糖含量的灵芝菌丝发酵液的制备方法，以解决现有技术中灵芝培养方法生产周期较长，需要养子实体，成本较高，而且灵芝多糖产率不够高、规模化生产困难以及不同批次间活性成分组成及含量有较大差异等问题。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

根据本发明的一方面，本发明涉及一种高灵芝多糖含量的灵芝菌丝发酵液的制备方法，包括：

将灵芝菌株经斜面试管培养后得到菌丝块，取所述菌丝块接种到平板培养基进行菌丝培养后转接到麦芽培养基，25～29℃液体发酵培养3～7天。

灵芝多糖既存在于菌丝体细胞内，也可以分泌于细胞外，因此可从灵芝子实体、孢子中分离提取，也可以从液体发酵的菌丝体中提取。现有技术常常培养灵芝子实体来得到灵芝多糖，但该方法耗时长，不适合规模化生产，且存在于子实体内的灵芝多糖在提取时也较难渗出。