[发明专利]一种表达幽门螺杆菌NapA蛋白的重组载体、重组菌株及其制备方法、应用

说明书

本发明涉及一种表达幽门螺杆菌NapA蛋白的重组载体、重组菌株及其制备方法、应用，属于生物技术领域。本发明在构建重组质粒pNZ8110Δsp‑napA时，将pNZ8110中分泌信号序列去掉，因此本发明中表达的NapA分子中不携带分泌信号肽，分子量为15KD，避免了重组菌株在分泌表达蛋白失败时，因信号肽无法在菌体中切除而对NapA生物活性造成的不利影响。本发明提供的表达幽门螺杆菌NapA的乳酸乳球菌重组菌株不仅可用于制造免疫调节性药品，而且可用于生产具有免疫调节功效的保健食品，对食品过敏、免疫抑制和肿瘤等疾病防治具有重要意义，可产生可观的社会和经济效益。

技术领域

一种表达幽门螺杆菌NapA蛋白的重组载体、重组菌株及其制备方法、应用，属于生物技术领域。

背景技术

目前研究表明，一些过敏性疾病、感染和肿瘤与免疫功能失调有关[Schwartz JS,Tajudeen BA,Cohen NA.Medical management of chronic rhinosinusitis-a review oftraditional and novel medical therapies.Expert Opin Investig Drugs.2017Oct；26(10):1123-1130.//Woodward J,Gkrania-Klotsas E,Kumararatne D.Chronic norovirusinfection and common variable immunodeficiency.Clin Exp Immunol.2017Jun；188(3):363-370.]。而治疗这些免疫功能相关性疾病，常缺乏特效的免疫调节剂。新型免疫调节剂的研究对提高这些疾病的防治技术具有重要意义[Gernez Y,Nowak-WegrzynA.Immunotherapy for Food Allergy:Are We There Yet？J Allergy Clin ImmunolPract.2017Mar-Apr；5(2):250-272.//Kobernick AK,Burks AW.Active treatment forfood allergy.Allergol Int.2016Oct；65(4):388-395.//Li Q,Prince ME,MoyerJS.Immunotherapy for head and neck squamous cell carcinoma.OralOncol.2015Apr；51(4):299-304.]。对于食品过敏等免疫失调性疾病，口服免疫调节剂的研制以其用药途径安全、方便、合理等优点而具有发展前景，但限于免疫调控机制的复杂性、胃肠道内的特殊微环境和现有技术水平，目前口服免疫调节剂的研制尚多处于探索阶段[Brotons-Canto A,Martín-Arbella N,Gamazo C,Irache JM.New pharmaceuticalapproaches for the treatment of food allergies.Expert Opin Drug Deliv.2016Oct 27:1-12.//Zécri FJ.From Natural Product to the First Oral Treatment forMultiple Sclerosis:The Discovery of FTY720(Gilenya^TM)？Curr Opin ChemBiol.2016Jun；32:60-6.]。由于胃肠道中消化液对生物制剂的降解作用，为提高口服生物制剂的免疫效果，常需要借助细菌载体递送免疫活性蛋白[Davitt CJ,LavelleEC.Delivery strategies to enhance oral vaccination against entericinfections.Adv Drug Deliv Rev.2015Aug 30；91:52-69.]。