[发明专利]一种三疣梭子蟹新型Crustin基因及其重组蛋白的应用

说明书

本发明涉及一种三疣梭子蟹新型Crustin基因及其重组蛋白的应用，涉及三疣梭子蟹基因工程，该三疣梭子蟹新型Crustin基因序列如SEQ NO.1所示，本发明还提供一种制备三疣梭子蟹新型Crustin基因重组蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)构建三疣梭子蟹新型Crustin基因重组表达载体；(2)将步骤(1)所得重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；(3)将分离纯化步骤(2)所得的表达产物，获得重组蛋白；与现有技术相比，本发明具有如下优点：Crustin基因的重组蛋白可能广泛参与了三疣梭子蟹抗微生物感染的先天免疫反应，在微生物新药物开发上显示出诱人的应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及一种三疣梭子蟹新型Crustin基因及其重组蛋白的应用。

背景技术

抗菌肽是广泛存在于生物界中的双亲性小分子碱性多肽，是机体固有免疫的关键因子之一。Steiner最早在天蚕中发现后，到目前为止，在各种生物中总共发现了800 多种抗菌肽。根据抗菌肽的序列、二级结构和抗菌特性等，将已发现的抗菌肽分为四大类：(1)不含半胱氨酸的线型抗菌肽，如天蚕素、马盖宁等；(2)具有半胱氨酸的环型抗菌肽，如防御素，抗真菌肽等；(3)富含某一种或两种氨基酸的抗菌肽，主要包括富含脯氨酸的抗菌肽以及富含甘氨酸的抗菌肽等；(4)由前体大分子酶解产生的抗菌肽，如鲎的血蓝蛋白。Crustin作为一种针对革兰氏阳性菌的抗菌肽，首先是在岸蟹中发现的 (Relf et al.1999)。随后的研究发现其氨基酸序列在其C末端有12个Cys，其中8个位置保守，形成WAP结构域。

三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是一种重要的海产经济蟹类，由于其营养丰富、生长迅速等优点，已成为我国重要海水养殖品种。但随着养殖规模不断扩大以及集约化程度不断提高，由细菌、真菌等引起的多种疾病在三疣梭子蟹养殖群体中频频爆发，造成了巨大的经济损失，严重制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。目前蟹病的防治仍主要采用传统抗生素药物防治，但长期盲目滥用药物，容易造成耐药性等问题，导致产品质量下降，环境污染及对人类健康构成潜在威胁等不良后果。Crustin作为一种重要的抗菌肽在其免疫防御中发挥着非常重要的作用。因此，这就迫切需要从三疣梭子蟹自身的免疫防御因子入手研究其抗病机制和开发新型的抗菌药物进行免疫防治。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种三疣梭子蟹新型的Crustin基因。

本发明所要解决的另一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种制备三疣梭子蟹新型Crustin基因的重组蛋白。

本发明所要解决的又一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种三疣梭子蟹新型Crustin基因重组蛋白的应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：该三疣梭子蟹新型Crustin基因，其特征在于：所述三疣梭子蟹新型Crustin基因的序列如SEQ NO.1所示。