[发明专利]一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器及其构建方法

权利要求书

1.一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)将PDGF-BB抗体修饰到氧化石墨烯表面后，将所述氧化石墨烯固定到电极表面，再采用牛血清白蛋白对所述电极表面进行封闭，得到PDGF-BB抗体修饰电极；

2)取PDGF-BB溶液滴加至所述PDGF-BB抗体修饰电极的表面进行PDGF-BB与PDGF-BB抗体之间的特异性结合反应，得到PDGF-BB抗体—PDGF-BB修饰电极；

3)将PDGF-BB适配体-引物滴加至PDGF-BB抗体—PDGF-BB修饰电极表面进行PDGF-BB与PDGF-BB适配体之间的特异性结合反应，得到具有PDGF-BB抗体—PDGF-BB—PDGF-BB适配体-引物三层夹心式结构的电极；

4)将H1修饰纳米金复合物和H2滴加至具有PDGF-BB抗体—PDGF-BB—PDGF-BB适配体-引物三层夹心式结构的电极表面，进行纳米金增强链式杂交反应，即得；

其中，

H1序列为：5’-TACGTGGCTTGGACCGACCGAATTAACGATA-3’；

H2序列为：5’-GTCCAAGCCACGTATATCGTTAATTCGGTCG-3’；

引物序列为：TATCGTTAATTCGGTCG。

2.根据权利要求1所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：将氧化石墨烯分散液采用含1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-N-羟基琥珀酰亚胺的混合溶液活化后，再与PDGF-BB抗体进行反应，得到PDGF-BB抗体修饰氧化石墨烯，所述PDGF-BB抗体修饰氧化石墨烯滴加到电极表面后，采用牛血清白蛋白对所述电极表面进行封闭，得到PDGF-BB抗体修饰电极。

3.根据权利要求1所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤2)中，特异性结合反应的条件为：温度为30～37℃，时间为1～2h。

4.根据权利要求1所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤3)中，特异性结合反应的条件为：温度为30～37℃，时间为1～2h。

5.根据权利要求1所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：步骤4)中，链式杂交反应的条件为：温度为30～37℃，时间为2～4h。

6.根据权利要求1所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：在含纳米金的溶液中加入含末端巯基修饰的H1溶液中，在室温下反应，即得H1修饰纳米金复合物。

7.根据权利要求6所述的一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器的构建方法，其特征在于：所述含纳米金的溶液通过如下方法得到：将HAuCl4溶液加热到沸腾，再加入柠檬酸钠还原剂，进行还原反应。

8.一种用于电化学检测PDGF-BB的生物传感器，其特征在于：由权利要求1～7任一项所述的方法制备得到。