[发明专利]一种四季兰的组培快繁方法

权利要求书

1.一种四季兰的组培快繁方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，其特征在于具体步骤为：

(1)外植体的消毒：以正在开花、生长健壮、无病虫害的四季兰作为母本，切取母本花梗上的花梗芽作为外植体，首先用流水冲洗花梗芽，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1min-2min，随后将花梗芽表面的苞叶剥去，接着在植物消毒液中浸泡8min-15min后继续剥去一层苞叶，然后在所述植物消毒液中继续浸泡5min-10min，用无菌水3-5次，得消毒后的外植体；所述植物消毒液由以下重量份的原料混合制成：甘草酸0.05-0.08份，板蓝根提取物0.8-1.2份，柴胡提取物0.5-0.8份，OP-10 6-8份，水150-200份；

(2)诱导培养：将所述消毒后的外植体的两端切口，将外植体接种在诱导培养基中，在温度为23-25℃的条件下暗培养10天，然后移至温度为23-25℃、光照强度为1500lx的室内，每天光照10-14h进行培养，培养时间为40-45天；

(3)继代培养：将诱导培养所萌发的小芽，自基部剥离后，接种到继代培养基上，培养温度23-25℃，光照时间为12-14h/d，光照强度为1500lx；

(4)壮苗培养：继代增殖培养4-6代后，选择高2cm以上、外植体上有明显突起的小苗转入壮苗培养基中培养，培养温度23-25℃，光照时间为12-14h/d，光照强度为2500lx，培养至根数为3-5条，叶片3-4片，苗高4-8cm，即可炼苗，炼苗后得到可以移栽的四季兰幼苗。

2.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述诱导培养基为：MS+0.3-0.5mg/L6-BA+0.2-0.4mg/LNAA+0.2-0.4mg/L激动素+40-55g/L辣木叶汁+30-40g/L桑叶汁+40-50mg/L半胱氨酸+20-25g/L蔗糖+6-8g/L琼脂，pH为5.4-5.5。

3.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述继代培养基的组成为：Miller+0.2-0.3mg/L6-BA+0.1-0.2mg/LNAA+0.1-0.2mg/L激动素+0.05-0.08mg/L玉米素+40-55g/L辣木叶汁+30-40g/L桑叶汁+20-25g/L蔗糖+6-8g/L琼脂，pH为5.5-5.6。

4.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述壮苗培养基的组成为：Miller+0.2-0.3mg/L6-BA+0.1-0.2mg/LNAA+2-4mg/L吲哚丁酸+40-55g/L辣木叶汁+30-40g/L桑叶汁+20-25g/L蔗糖+6-8g/L琼脂，pH为5.6-5.7。

5.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述柴胡提取物是将柴胡用8-10倍量的水煎煮2次，每次1.5-2h，合并提取液，过滤浓缩至干得到。

6.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述板蓝根提取物是将板蓝根用8-10倍量的水煎煮2次，每次1.5-2h，合并提取液，过滤浓缩至干得到。

7.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述辣木叶汁的制备方法是：先洗净叶片然后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为桑叶汁。

8.根据权利要求1所述的四季兰的组培快繁方法，其特征在于：所述桑叶汁是将新鲜桑叶洗净后充分捣碎，再用纱布过滤，所述滤液即为桑叶汁。