[发明专利]Homer2单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了Homer2单克隆抗体及其应用。本发明提供两株能稳定分泌特异性识别Homer2蛋白的单克隆抗体Homer2 2B7及Homer2 2F8的杂交瘤细胞株，其保藏编号分别为CCTCC No:C2017193、CCTCC No:C2017195。利用本发明提供的能够识别不同天然Homer2蛋白抗原位点的单克隆抗体制备了用于检测Homer2蛋白的免疫检测工具，含Homer2 2B7及Homer2 2F8的免疫组化试剂盒。本发明的双抗夹心ELISA方法批内变异系数为9.7%，其最低检测浓度为32.23 pg/ml。因此本发明的单克隆抗体具有更广泛的应用空间。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及Homer2 的单克隆抗体，产生该抗

体的杂交瘤细胞株，以及该抗体的免疫检测用途。

背景技术

Homer蛋白是在细胞内信号转导过程中非常重要的一种骨架蛋白，它参与了许多神经细胞的活动，包括调节钙离子的平衡及学习与记忆过程中突触重塑的细胞骨架的构成等。Homer蛋白家族包括了三个成员，Homer1、Homer2和Homer3，他们通过外显子不同的剪接，有形成了多种亚型。所有的亚型都含有N-端的EVH1区域，该区域可以和mGluR、IP₃R、TRPC等富含脯氨酸蛋白结合，长型Homer蛋白在C-端存在CC区域，通过CC区域Homer蛋白之间可以形成同源或异源二聚体，而短型的Homer不存在CC-区域，则不能形成二聚体，但可以通过其EVH1区域与长型Homer竞争与富含脯氨酸的受体蛋白结合，从而来调节mGluR、IP₃R、TRPC等受体的功能。Homer2蛋白广泛存在于神经、免疫及骨骼肌等系统中，调节着不同组织的生理病理过程。例如，通过调节体内钙离子的信号，参与体内众多生理和病理过程，研究报道骨架蛋白Homer2通过竞争性结合钙调磷酸酶（NFAT）和蛋白激酶B（AKT），而抑制T细胞活性，从而调节人体的免疫功能。本实验室的前期研究表明在大动脉粥样硬化性卒中的病人白细胞中Homer2信使RNA的表达水平显著增高，并且对于大动脉粥样硬化性卒中具有良好的诊断价值。近年来Homer2蛋白的功能的研究在世界范围内正广泛的开展，但在市场上还缺少针对Homer2蛋白的单克隆抗体。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供两株能稳定分泌特异性识别Homer2蛋白不同位点的单克隆抗体Homer2 2B7及Homer2 2F8的杂交瘤细胞株以及该两种单克隆抗体在制备用于检测Homer2蛋白的免疫检测工具中的应用。本发明的单克隆抗体效价高、特异性强，因此具有更广泛的应用空间。

为实现上述目的本发明提供以下技术方案：

在本发明的第一方面，提供分泌Homer2单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，其保藏编号为CCTCC NO：C2017193和CCTCC NO：C2017195，均是His-Homer2免疫小鼠后至尾血效价检测达1:25600后，加强免疫后进行细胞融合，His-Homer2（110-354aa）肽段筛选获得，Homer2对应的氨基酸序列为SEQ NO:1，Homer2（110-354aa）的氨基酸序列对应SEQ NO:1的第110aa-354aa。

在本发明的第二方面，提供一种Homer2单克隆抗体Homer2 2B7，由编号为CCTCCNO：C2017193的杂交瘤细胞株分泌。

在本发明的第三方面，提供一种Homer2单克隆抗体Homer2 2F8，由编号为CCTCCNO：C2017195的杂交瘤细胞株分泌。

在本发明第四方面，提供单克隆抗体Homer2 2B7和Homer2 2F8在制备用于检测Homer2蛋白的免疫检测工具中的应用。

优选地，所述免疫检测工具为试剂盒、芯片或试纸。