[发明专利]一种不动杆菌Y-3及其L-天冬酰胺酶基因的表达与应用在审
| 申请号： | 201711228833.3 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN108728371A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 吕凤霞;焦琳舒;陆兆新;张充;别小妹;赵海珍 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/55;C12N15/70;C12N15/75;A23L5/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 孙昱 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 天冬酰胺酶 不动杆菌 丙烯酰胺 基因 应用 食品加工领域 淀粉类食品 核苷酸序列 菌种保藏号 催化活力 高温加工 油炸食品 有效抑制 致癌物质 筛选 土壤 | ||
1.一种来源于土壤的不动杆菌（
2.一种L-天冬酰胺酶基因AsAase，其特征在于，其来源于权利要求1所述的不动杆菌（
3.权利要求2所述的L-天冬酰胺酶基因AsAase编码的L-天冬酰胺酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一种L-天冬酰胺酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）对权利要求2所述的L-天冬酰胺酶基因AsAase进行PCR扩增；
（2）构建L-天冬酰胺酶基因AsAase原核表达载体；
（3）重组L-天冬酰胺酶在原核细胞中进行表达。
5.根据权利要求4所述的L-天冬酰胺酶的制备方法，其特征在于，步骤（1）中PCR扩增采用以下引物：
F1-
R1-
F2-
R2-
6.根据权利要求4所述的L-天冬酰胺酶的制备方法，其特征在于，步骤（1）中PCR扩增体系为：2×Taq Master Mix 25μL，DNA模板2μL，dd H2O 19μL，上下游引物各2μL；PCR扩增条件：94℃预变性3 min；94℃变性50s，50℃退火50s，72℃延伸60s，30个循环；72℃延伸10min。
7.根据权利要求4所述的L-天冬酰胺酶的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所用表达载体为pET-30a、pET-32a、PCBS221或PCBS345中的任意一种。
8.根据权利要求4所述的L-天冬酰胺酶的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所用原核表达宿主为大肠杆菌或枯草芽孢杆菌。
9.权利要求3所述的L-天冬酰胺酶在食品抑制丙烯酰胺产生中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，将原料浸泡在浓度为20-30 IU/mL的L-天冬酰胺酶溶液中，其物料比为1:2-1:3，浸泡温度35-40℃，时间0.5-1.5h。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京农业大学，未经南京农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711228833.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
