[发明专利]检测运动基因SNP的引物组及其应用和产品以及检测运动基因SNP的检测方法及应用

说明书

本发明涉及生物检测技术领域，具体而言，提供了一种检测运动基因SNP的引物组及其应用和产品以及检测运动基因SNP的检测方法及应用。本发明提供的引物组包含用于检测AMPD1基因、PPARGC1A基因、ACTN3基因、NRF‑1基因和COL5A1基因的探针组和一组引物对，可以同时检测五种基因的SNP情况，特异性好没有交叉反应。本发明提供的一种用于检测运动基因SNP的产品，检测操作方便，灵敏度高，特异性强，同时给出五个基因是否是野生型、突变纯合子或突变杂合子的结果。本发明提供的运动基因SNP多重检测方法操作简单，检测速度成倍提高，检测特异性好，结果准确，为运动基因SNP检测提供了快速多重检测方法。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种检测运动基因SNP的引物组及其应用和产品以及检测运动基因SNP的检测方法及应用。

背景技术

单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)，主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括转换、颠换、缺失和插入，形成的遗传标记，其数量很多，多态性丰富，从理论上来看每一个SNP位点都可以有4种不同的变异形式，但实际上发生的只有两种，即转换和颠换，二者之比为2:1。SNP在探索人类健康和癌症诊断扮演着重要角色。至今已发现200多个染色体和18个线粒体的基因多态性位点和人类的肌肉力量、身体活动水平、耐力水平和训练敏感性相关。

目前已报道多种SNP的检测方法，聚合酶链式反应(PCR)作为经典的方法，通过进行目标序列预扩增来检测SNP。尽管PCR扩增的方法能达到很高的检测灵敏度，但也存在一些缺点，如仪器试剂成本和对实验人员的操作水平较高，选择性低及需要高精确度的温度循环仪器等。其他反应如滚环扩增反应(RCA)、链接酶链式扩增反应(LCR)、链置换扩增反应(SDA)由于其灵敏度原因，不能用于低浓度样品和多重SNP检测。

已报道的检测LAMP扩增方法主要是使用荧光标记的DNA探针、焦磷酸根离子沉淀、金属荧光指示剂等。荧光标记物质不仅会出现光漂白和光谱重叠等问题，而且成本较高，如精确定量还需要使用荧光显微镜或激光扫描仪等昂贵的仪器。另外，如果使用标记探针，在均相溶液中发生反应的探针信号很难与未反应的探针产生的背景信号分开。使用焦磷酸根离子或金属荧光指示剂进行检测，检出限高，灵敏度低，而且特异性差，极容易产生气溶胶等污染，造成假阳性结果。用凝胶电泳分离分析LAMP产物，而需要繁琐的步骤、高成本及很长的反应时间。

综上所述，找到一种可以同时检测多个位点SNP，操作快速简便，结果准确，特异性好的探针组、反应体系和检测方法具有重要的意义。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种用于检测运动基因SNP的引物组；本发明的第二目的在于提供一种上述引物组在检测运动基因SNP中的应用；本发明的第三个目的在于提供一种上述引物组在制备用于检测运动基因SNP的产品中的应用；本发明的第四个目的在于提供一种用于检测运动基因SNP的产品；本发明的第五个目的在于提供一种用于运动基因SNP的多重检测方法；本发明的第六个目的在于提供上述运动基因SNP的多重检测方法在运动基因SNP检测中的应用，以缓解现有技术中存在的若想检测AMPD1、PPARGC1A、ACTN3、NRF-1和COL5A1五种基因SNP时需要针对每种基因分别进行实验设计，费时费力的问题。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

本发明提供了一种用于检测运动基因SNP的引物组，所述引物组包括1个引物对和5个探针组，所述5个探针组包括：

用于检测AMPD1基因的探针组、用于检测PPARGC1A基因的探针组、用于检测ACTN3基因的探针组、用于检测NRF-1基因的探针组和用于检测COL5A1基因的探针组；

所述引物对包括