[发明专利]A型H5亚型流感病毒的检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了A型H5亚型流感病毒的检测试剂盒及其应用。其中，该流感病毒的检测试剂盒包括：基底层；第一包被膜，所述第一包被膜形成在所述基底层上，且包被有荧光标记的第一抗体，所述第一抗体特异性结合所述A型H5亚型流感病毒；第二包被膜，所述第二包被膜形成在所述基底层上，并与所述第一包被膜相连，所述第二包被膜上设置有分离的第一区域和第二区域，且第一区域位于近所述第一包被膜端，其中，所述第一区域包被有第二抗体，所述第二抗体和所述第一抗体能够特异性结合所述A型H5亚型流感病毒，所述第二区域包被有抗抗体，所述抗抗体能够特异性结合所述第一抗体。该试剂盒的检测灵敏度高、特异性强、速度快。

技术领域

本发明涉及病毒检测领域，具体地，涉及A型H5亚型流感病毒的检测试剂盒及其应用，更具体地，涉及A型H5亚型流感病毒的检测试剂盒和检测A型H5亚型流感病毒的方法

背景技术

A型流感病毒即甲型流感病毒为常见流感病毒，甲型流感病毒容易发生变异，其亚型常被人们称为“禽流感”。禽流感是严重危害世界养禽业的毁灭性疫病，其病原容易突变，具有多个血清型，给该病的防控带来困难，病毒基因变异后能够感染人类，感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡。甲型流感H5亚型对人类致病性高,据WHO统计，人感染H5亚型的死亡率高达60％。

目前常见的A型H5亚型流感病毒的检测方法主要有：核酸检测和病毒分离鉴定。核酸检测有RT-PCR检测和real-time RT-PCR检测方法，核酸检测依赖于样本模板RNA的质与量，操作要求严格，需要大量仪器与设备及专业人员操作，检测时间较长，检测灵敏度高。病毒分离鉴定常用于对阳性样品病毒的亚型鉴定，需要专门实验室才能进行。

由此，A型H5亚型流感病毒的检测方法有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种流感病毒的检测试剂盒，该试剂盒的检测灵敏度高、特异性强、能快速、简便地检测A型H5亚型流感病毒。

因而，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种流感病毒的检测试剂盒。根据本发明的实施例，该试剂盒包括：基底层；第一包被膜，所述第一包被膜形成在所述基底层上，且包被有荧光标记的第一抗体，所述第一抗体特异性结合所述A型H5亚型流感病毒；第二包被膜，所述第二包被膜形成在所述基底层上，并与所述第一包被膜相连，所述第二包被膜上设置有分离的第一区域和第二区域，且第一区域位于近所述第一包被膜端，其中，所述第一区域包被有第二抗体，所述第二抗体和所述第一抗体能够特异性结合所述A型H5亚型流感病毒，所述第二区域包被有抗抗体，所述抗抗体能够特异性结合所述第一抗体。

根据本发明实施例的试剂盒，发明人通过对大量A型H5亚型流感病毒的抗体进行筛选，获得能同时特异性结合于A型H5亚型流感病毒的两种抗体，即本发明的两种抗体(即第一抗体和第二抗体)能与抗原的不同表面决定簇特异性结合，从而形成双抗体夹心复合物，基于检测复合物中的第一抗体上带的荧光标记的荧光强度来判断样品中是否存在所说的抗原。该试剂盒的检测灵敏度高、特异性强，检测时间短，检测成本低，易于操作和推广。

另外，根据本发明上述实施例的流感病毒的检测试剂盒，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，该方法进一步包括：吸水垫，所述吸水垫与所述第二包被膜的远所述第一包被膜端相连。

根据本发明的实施例，所述第一抗体和所述第二抗体均为单克隆抗体。

根据本发明的实施例，所述第一抗体为购自昆明云大单抗中心的编号为F5-25的单克隆抗体，所述第二抗体为购自昆明云大单抗中心的编号为F5-39的单克隆抗体。

根据本发明的实施例，所述第一抗体为购自昆明云大单抗中心的编号为F5-35的单克隆抗体，所述第二抗体为购自昆明云大单抗中心的编号为F5-71的单克隆抗体。