[发明专利]一种使用大剂量DNA免疫技术免疫动物使血清中抗体滴度提高的方法有效
| 申请号: | 201711214901.0 | 申请日: | 2017-11-28 |
| 公开(公告)号: | CN107987159B | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
| 发明(设计)人: | 梅芹;刘玮;丁毅;陆青玲;马诗静;施利波;李竞;陈智胜 | 申请(专利权)人: | 上海药明生物医药有限公司 |
| 主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18 |
| 代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 郑权 |
| 地址: | 201403 上海市奉*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 使用 剂量 dna 免疫 技术 动物 血清 抗体 提高 方法 | ||
1.一种使用大剂量DNA免疫技术使免疫动物血清中抗体滴度提高的动物血清抗体生产方法,其特征在于,包括:
1)将蛋白质抗原表达质粒、CPG-ODN佐剂和Aluminum Phosphate佐剂混合,制成混合液1;蛋白质抗原、CPG-ODN佐剂和Aluminum Phosphate佐剂混合,制成混合液2;混合液2中蛋白质抗原的用量为每只大鼠或小鼠40-60μg,CPG-ODN佐剂的用量为每只大鼠或小鼠10μg,Aluminum Phosphate佐剂用量体积为免疫材料总体积的1/2;
2)用质粒DNA-佐剂混合液1对免疫动物进行多个部位的注射,间隔7-14天后使用蛋白质抗原-佐剂混合液2进行注射,每间隔7-14天采用质粒DNA-佐剂混合液1与蛋白质抗原-佐剂混合液2交替免疫,经过多次注射后检测动物的血清中针对特异性抗原的抗体滴度;
所述免疫动物选自大鼠、小鼠;
所述混合液1中蛋白质抗原表达质粒的用量为每只大鼠或小鼠100~500μg,所述CPG-ODN佐剂的用量为每只大鼠或小鼠10μg,所述Aluminum Phosphate佐剂用量为免疫材料总体积的1/2体积。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,经过2-5次注射免疫后检测动物的血清中针对特异性抗原的抗体滴度。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述进行多个部位的注射免疫,是指动物试验中常规的注射给药部位。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述多个部位包括股二头肌部位、背部皮肤内、背部皮下部位。
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