[发明专利]一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及高效液相色谱固定相，具体的说是一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相及其制备和应用。

背景技术

反相液相色谱(RPLC)是当前分离分析和分离制备中应用最为广泛的色谱模式，经过几十年的发展和完善，现在已成为医学、生化、药物临床、食品、化学化工、卫生、环保检测和商品检验等领域不可缺少的手段。它的特点是固定相的极性比流动相弱。其依靠疏水固定相与溶质之间的疏水相互作用实现弱极性和中等极性化合物的高效分离。[Aguilar M I,Hearn T W.Method.Enzymol.1996,270,3-26.]传统烷基硅胶键合相，特别是C18和C8硅胶键合相是使用最广泛的反相色谱固定相，通常只需优化流动相组成就可实现对大多数有机化台物的分离分析。但是在反相色谱中每种柱子都有各自的优势和不足，没有一种柱子是万能的。[Jandera,P.Janas,P.Anal.Chim.Acta.2017,12-32.]

随着蛋白质组学、代谢组学、中药现代化、环境保护等研究领域的迅速发展，强极性和亲水性的小分子物质迅速成为分析化学和生物化学领域的重要研究对象，但这类物质往往较难在传统的液相色谱柱上得到有效分离，因此限制了它们的应用。这就需要投入大量的工作进行开发新的固定相以满足需求，所以对新型的色谱分离材料的追求永远是这个领域的热点。[Wang Lujun,Wei Weili,Xia Zhining et al.TrAC-Trend.Anal.Chem.2016,495-506.]

发明内容

本发明的目的在于提供了一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相，MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相结构如式一所示，

所述固定相为将末端带有甲氧基的聚二甲基硅氧烷(MT-PDMS)键合到硅胶载体上，然后用HMDS进行封端处理，进而获得式一所示MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相。

一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相的制备方法，

1)将硅胶原料在盐酸介质中回流活化，然后用蒸馏水洗涤至洗出液呈中性，干燥至恒重，制得活化硅胶；

2)将所述活化硅胶直接与MT-PDMS反应，将MT-PDMS键合到硅胶载体上；

3)将所得原料用六甲基二硅胺烷(HMDS)进行封端处理。

在所述步骤1)中，将硅胶在盐酸介质回流活化6-10hr，而后然后用蒸馏水洗涤至洗出液呈中性，再于100-120℃干燥得活化硅胶，待用；其中，硅胶的质量与盐酸的体积之比为1:8-1:12(g/ml)。

所述盐酸的质量分数为10％-15％。

所述步骤2)将所述活化硅胶直接与MT-PDMS在溶剂的存在下经催化剂搅拌下回流反应，将MT-PDMS键合到硅胶载体上，反应后洗涤、离心、干燥，待用；所述硅胶表面硅羟基与MT-PDMS试剂的摩尔比为1:1.5-1:3。

所述搅拌反应为于无水无氧条件下磁力搅拌回流反应24-48hr，反应完全后经丙酮洗涤、离心机离心3-5次，离心后干燥；所述溶剂为无水甲苯，催化剂为三乙胺；其中，甲苯的加入量与硅胶的体积质量比为5-10:1(mL/g)。

所述步骤3)将所得原料用HMDS在溶剂的存在下经催化剂搅拌下回流反应进行封端处理，而后洗涤、离心、干燥，待用；所述硅胶表面硅羟基与HMDS的摩尔比为1:3-1:4。

所述搅拌反应为于无水无氧条件下磁力搅拌回流反应4-6hr，而后加入10ul去离子水再继续反应1-2hr反应后过滤，用丙酮抽提24-48hr，干燥至恒重；其中，甲苯的加入量与硅胶体积质量比为5-10:1(mL/g)，HMDS的加入量与硅胶体积质量比为3-5:1(mL/g)；所述溶剂为无水甲苯，催化剂为三乙胺。

一种MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相的应用，所述MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相在反相高效液相色谱中的应用。

MT-PDMS键合硅胶反相高效液相色谱固定相能够对同系物进行分离，同系物为苯同系物、核苷类、嘧啶类化合物。

本发明获得的MT-PDMS键合硅胶反相色谱固定相具有以下优点：

1.本发明固定相结构新颖,其是MT-PDMS与硅胶通过化学方法键合而成；

2.本发明固定相制备过程中原料易得，操作步骤简单；