[发明专利]一种抗钙化短肽及其应用

说明书

本发明涉及一种抗钙化短肽，特别涉及一种抗钙化短肽及其应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的实验证明，本发明提供的短肽能够显著抑制华法林和高钙、高磷诱导的瓣膜间质细胞钙化，并抑制低糖培养诱导的瓣膜间质细胞凋亡。因此，本发明提供的短肽可能成为良好的低副作用抗钙化药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，特别涉及一种抗钙化短肽及其应用。

背景技术

钙化性疾病是临床上十分常见的一类以非骨组织发生类似于成骨过程并以钙盐沉积为主要表现的疾病，钙化最常好发于心脏瓣膜、大血管、滑膜、气管软骨等具有弹性的软组织。近年来，越来越多的研究表明异位钙化如最常见的心脏瓣膜和血管是一个在外因和内因共同作用下的主动调节过程。目前临床上异位钙化性病变主要原因有慢性炎症性疾病如长期动脉粥样硬化，肾功能不全引起的钙磷代谢障碍，内分泌疾病引起的钙磷代谢障碍，长期服用可导致钙化的药物如华法林等。非常遗憾的是，目前临床上尚没有一种有效的预防或治疗钙化的手段，现行的治疗都是只能利用人造器官替代严重钙化的组织，如人工瓣膜替换钙化的心脏瓣膜，人造血管替代钙化的血管等。对于肾功能不全的患者来说，没有一种有效的方法能够延缓长期透析相关的心血管钙化，急需要开发一些有效的治疗方法尤其是长期治疗方法来缓解钙化性疾病的危害。申请人所在研究小组前期在国家自然科学基金项目(81100162,81570247)资助下，首次研究了肽酶抑制蛋白PI16抑制主动脉瓣钙化的作用，我们首次证明过表达人PI16基因编码的蛋白可以显著华法林和高钙高磷诱导的心脏瓣膜钙化。通过对PI16蛋白结构域的分析和蛋白相互作用研究，我首次发现PI16的一段氨基酸序列能够和完整的蛋白一样发挥抗钙化作用，我们通过对该段氨基酸进行突变改造，我们发明了理化性质更为稳定的一种抗钙化短肽。

发明内容

本发明的目的是提供一种来源于人肽酶抑制蛋白PI16，经过点突变后的一段短肽，该短肽具有显著稳定性和抗钙化作用。

本发明的另一目的是提供此抗钙化短肽的药物用途。

本发明的抗钙化短肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1(Val-Ala-Leu-His-Asn-Leu-Tyr-Arg-Ala-Gln-Val-Ser-Pro-Thr)所示,该多肽由14个氨基酸组成。

本发明还包括本发明的短肽的制备方法，所述方法选自常规的固相合成方法，溶液中合成方法，基因重组合成方法或化学合成方法。

本发明所述的药物用途是治疗钙化性疾病的药物用途。其所述的钙化性疾病是心脏瓣膜钙化,瓣环钙化，肾脏疾病引起的异位软组织钙化包括但不限于心脏瓣膜、血管、气管等，动脉粥样硬化性或钙磷代谢紊乱引起的心脏瓣膜、血管钙化。

本发明还包括含有本发明短肽的药物组合。本发明的药物组合，可以含有药物可接受的各类载体。本发明的药物组合可以任何制剂形式存在，如注射剂或口服制剂，优选为冷冻干燥注射剂。

具有本发明氨基酸序列的多肽既可以以多肽形式单独存在，也可以与其他蛋白或多肽进行融合，或被或被进行诸如乙酰化、甲基化修饰，或进行个别氨基酸的替代或突变，或插入蛋白表面的特定部位，或与其他物质连接使用。无论以何种形式存在，还有此氨基酸结构的多肽类物质均可能表现抗钙化特性。

含有此氨基酸序列的物质可以有各种不同的应用形式，包括体内和体外的抗钙化活性，以各种给药方式实现以抗钙化为目的的疾病治疗。

有益效果:

本发明短肽可以特异性地与p53蛋白结合，抑制其介导的细胞与组织钙化，还可以作用于其它未知靶点,用于制备治疗钙化性疾病的药物。

本发明的多肽具有长度短，易于合成，且在酸碱性环境下稳定的特点。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。