[发明专利]一种检测氧化应激损伤的生物标志物及其应用

说明书

本发明提供了一种基于检测角蛋白1的变化，从而预测或检测氧化应激皮肤损伤的方法。皮肤在受到因为氧化应激水平上升而造成的损伤后，其角蛋白1结构或含量会发生变化，这种变化与氧化应激造成的损伤呈正相关。

技术领域

本发明涉及一种检测细胞或组织氧化应激损伤的生物标志物，具体是以角蛋白1作为预测和检测氧化应激对细胞或组织损伤的检测方法及其应用。

背景技术

活性氧类是在氧不完全还原的情况下生成的一些化学物质，包括超氧阴离子、羟基自由基和过氧化氢。活性氧类即可以在线粒体氧化磷酸化过程中内源性生成，也可以在细胞对外源性物质、细胞因子或细菌侵染等的应答反应中生成。活性氧类是一把双刃剑，一方面越来越多的证据表明活性氧类作为胞内重要的信号分子发挥作用，另一方面活性氧类能氧化并损坏细胞大分子DNA、脂类和蛋白质，严重时可导致细胞死亡。当细胞中活性氧类的净含量超过其抗氧化能力时，氧化应激发生。由此可见氧化应激可能是活性氧类生成增多，或者抗氧化系统减弱，或者两种情况都出现而造成的。

氧化应激与许多不同的病理状态有关，包括心血管疾病、糖尿病、癌症、神经系统疾病等等，其中神经系统疾病包括脑卒中等。以脑卒中为例，大脑由于耗氧量高、脂肪酸含量高、抗氧化成分浓度低、某些区域铁浓度高等原因，对氧化损伤非常敏感，氧化应激在脑卒中的病理生理方面发挥着非常重要的作用。

目前检测氧化应激的方法普遍通过对各个活性氧分子的含量进行染色，都需要染料所以不能实时连续检测。活体组织上面检测更加困难。所以寻找一种无标记的检测氧化应激水平的生物学指标变得非常重要，而且也具有重大的社会经济意义以及临床意义。

发明内容

本发明提供了一种分子标记物在制备用于诊断和预测氧化应激诱导细胞或组织损伤的试剂或试剂盒中的应用，其中，所述分子标记物包括角蛋白1。

在一个实施例中，在所述检测氧化应激诱导细胞或组织损伤中，检测细胞或组织中的角蛋白1的时间点时，细胞或组织可以通过临床常见方法判断为损伤。

在一个实施例中，在所述预测氧化应激诱导细胞或组织损伤的方法中，检测细胞或组织中的角蛋白1的时间点时，细胞或组织还不能观察到损伤或使用临床常见方法判断为损伤。

在本发明中，所述角蛋白1包括基因水平、蛋白质水平、和蛋白结构变化中的一种或多种。其中，角蛋白1包括但不限于全长的角蛋白1，或角蛋白1缺失部分氨基酸序列的角蛋白1片段，或缺失部分氨基酸序列的角蛋白1片段和全长角蛋白1的混合，检测上述蛋白质包括但不限于蛋白质水平，还可以是基因水平，包括磷酸化、乙酰化等修饰水平。

在一个实施例中，所述角蛋白1还包括蛋白结构变化，其中，所述蛋白结构包括角蛋白1与其他蛋白例如角蛋白10所形成的二聚体结构，其中角蛋白1包括其缺失部分氨基酸序列的角蛋白1片段，即所述蛋白结构包括缺失部分氨基酸序列的角蛋白1片段和其他蛋白例如角蛋白10所形成的二聚体结构。

本发明中所述细胞为含有角蛋白1的任一种细胞，优选包括皮肤细胞、肿瘤细胞，所述组织为含有角蛋白1的任一种组织，优选包括皮肤组织、肿瘤组织。

本发明另一方面，提供了一种诊断和预测氧化应激诱导细胞或组织损伤的方法，包括以下步骤：

(1)当细胞或组织受到氧化应激损伤后，检测受试者的细胞或组织中的角蛋白1的含量、结构中的至少一种；

(2)检测所述受试者未受到氧化应激损伤下的细胞或组织中的角蛋白1的含量、结构中的至少一种；

(3)将步骤(1)和步骤(2)中获得的角蛋白1的含量、结构相对比，计算相应的变化率；

(4)根据所述变化率，诊断或预测所述受试者的氧化应激损伤程度。