[发明专利]一种同时检测肉制品中35种兽药残留的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体地，涉及一种用液相色谱-串联四级杆质谱同时检测肉制品中35种兽药残留的方法。

背景技术

兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质的残留。农药的使用在提高农作物产量的同时也带来了很多负面作用。

肉制品，是指用畜禽肉为主要原料，经调味制作的熟肉制成品或半成品，如酱卤肉、烧烤肉等。也就是说所有用畜禽肉为主要原料，经添加调味料的所有肉的制品，不因加工工艺不同而异，均称为肉制品，包括：酱卤肉、肉丸、腌腊肉等。肉制品为我们人体提供了大量的碳水化合物、蛋白质、维生素、无机盐等营养物质。近年来随着我国生活水平迅速提高，人们对肉制品的需求也大大增加，农牧业也随之蓬勃发展，但是面对动物疾病问题还是采用投喂兽药的方式，这样广大民众在食用肉制品时也同时食用兽药，因此肉制品中兽药残留的问题不容忽视。

兽药残留检测方法主要分为前处理和检测两部分。目前，肉制品中兽药残留的前处理方法大多采用传统的提取和净化方法，容剂消耗量大，操作过程繁琐，分析周期长，且易造成环境污染。肉制品相对于其他作物而言，其成分的特殊性和复杂性对前处理的要求更为严格，其它领域较为先进的前处理技术不能直接引用进来，这无疑又增加了实验的工作量和成本，与兽药残留分析的发展趋势背道而驰。迄今为止，在肉制品兽药残留检测领域，液相色谱-质谱联用技术在兽药残留分析中的应用较广，研究范围主要包括单个或单一类兽药残留分析，多类兽药残留同时分析的方法研究较少。因此，存在分析时间长，不能同时分析检测多种类兽药残留，分析过程繁琐，成本高等问题。

发明内容

针对现有技术的上述缺陷，本发明研发出了一种同时检测肉制品中35种不同种类兽药残留的方法。该方法选择性好、灵敏度高，节约试剂，极大地缩短了分析时间。

本发明的技术目是通过以下技术方案来实现：

本发明提供一种同时检测肉制品中35种兽药残留的的方法，包括以下步骤：

S1：混合标准品溶液的制备：制备兽药标准品储备液，然后将兽药标准品储备液混匀，定容，配置成浓度范围为20～200ng/mL混合标准品的标准溶液，待用；

S2：标准曲线绘制：吸取步骤S1所制备的标准溶液进样检测，分别记录其色谱峰面积，以标准溶液的浓度值为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，回归分析做成线性回归方程；

S3：样品前处理：取肉制品样品捣碎，加入水震荡后加入乙腈震荡提取，再加入无水硫酸钠、氯化钠震荡后离心，取上清液蒸发至干，定容过滤后得肉制品待测液；

S4：肉制品待测液的检测：将步骤S3所得肉制品待测液用液相色谱-三重四级杆质谱在质谱ESI源下正离子MRM模式下测定，外标法定量。

本发明优选地，所述步骤S4中的液相色谱-三重四级杆联质谱的检测条件为：

液相色谱检测条件：岛津LC20A，色谱柱Shim-pack XR-ODS，75mm×3.0mm,2.7um；流速：0.3mL/min；进样量：10uL；色谱柱温度：40℃；流动相A:乙腈，B：0.1％的甲酸水溶液；梯度：t＝7min，B＝75％；t＝10min，B＝10％；t＝11min，B＝10％；t＝11.1min，B＝95％；t＝15min，B＝100％。

质谱检测条件如下：气帘气:30.00L/min；碰撞电压:10.00V；喷雾电压:5500.00V；源温度:600.00℃；雾化气:60.00L/min；辅助加热气:60.00L/min。

本发明进一步地，所述步骤S1中兽药标准品储备液的制备方法如下：分别取35种兽药标准品用甲醇定容至1mg/mL，置于-20℃～-18℃中保存待用。

本发明进一步地，所述步骤S1中混合标准品的标准溶液的制备方法如下：分别吸取兽药标准品储备液并混合，用甲醇定容，所述兽药标准品在混合标准品溶液中的浓度均为1μg/mL，再将所述混合标准品溶液分别配制成标准浓度为20ng/mL、50ng/mL、80ng/mL、100ng/mL、200ng/mL的标准溶液。

本发明优选地，所述步骤S3中肉制品样品与无水硫酸钠、氯化钠的重量比范围为2:(4～8):(0.5～2.5)。

本发明更进一步地，所述步骤S3中肉制品样品与无水硫酸钠、氯化钠的重量比范围为2:(5～7):(1～2)。

本发明更优选地，所述步骤S3中过滤采用0.22微米滤膜。