[发明专利]一种人兽共患隐孢子虫双抗夹心胶体金免疫层析试纸

权利要求书

1.一种基于病毒检测的隐孢子虫双抗夹心胶体金免疫层析试纸，主要包括玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸、PVC底板；其特征在于：

金标垫上的金标抗体为CSpV单克隆抗体，硝酸纤维素膜上的指示线T线包被CSpV兔多克隆抗体、C线包被羊抗鼠抗体。

2.如权利要求1所述的一种基于病毒检测的隐孢子虫双抗夹心胶体金免疫层析试纸的制备方法，利用柠檬酸三钠还原法烧制胶体金溶液，之后利用胶体金对单克隆抗体进行标记，制备金标垫，组装试纸条，CSpV多克隆抗体作为检测线、羊抗鼠抗体作为质检线；具体步骤如下：

（1）胶体金的烧制

利用柠檬酸三钠还原法，向99mL ddH2O中加入1mL 1%氯金酸，沸腾后加入1mL 1%柠檬酸三钠，直至酒红色后，停止加热，制备40nm胶体金颗粒；

（2）金标抗体的制备

取1mL胶体金溶液，加入4µL 0.2mol/L K₂CO₃和6μg CSpV单克隆抗体，对单抗进行标记，标记后的金标抗体溶解于复溶液中4℃保存待用或直接滴加于金标垫上；

（3）试纸条的组装

取NC膜贴于PVC底板上，裁剪好的金标垫压NC膜上，样品垫压在金标垫上，吸水纸压在NC膜上，粘在底板上，按压各组状部分紧紧粘好；

检测线（T）与质控线（C）

将多抗浓度稀释到0.5mg/mL，取1µL点于检测线（T）位置，将羊抗鼠抗体浓度稀释到0.25mg/mL，取1µL点于质控线（C）位置。