[发明专利]一种从叶片山海绵中分离吡咯醛类化合物的方法及其吡咯醛类化合物

说明书

本发明公开了一种从叶片山海绵中分离吡咯醛类化合物的方法及其吡咯醛类化合物，将叶片山海绵破碎后，乙醇浸提，除盐，得到海绵总提取物；海绵总提取物用石油醚及二氯甲烷萃取得到吡咯醛类总提取物；吡咯醛类总提取物用硅胶色谱柱分离后，再进行反相色谱分离，再依次用制备高效液相法和半制备高效液相法进行单体纯化，得到8个高纯度的吡咯醛类化合物，其中两个为首次报道的新化合物。本发明的方法能够快速富集和分离吡咯醛类物质，且分离速度快、效率高。

技术领域

本发明属于药物分离工艺领域，具体涉及一种从叶片山海绵中分离吡咯醛类化合物的方法及其吡咯醛类化合物。

背景技术

海绵是最简单的多细胞动物，种类繁多，分为790属80科，超过8000个物种。海绵含有丰富的活性物质，是最重要的海洋活性物质资源之一。许多海绵来源的化合物具有特异性的抗肿瘤、抗微生物、抗病毒以及抑制各种生物酶等生理活性。海绵化学成分及生物活性研究一直是海洋天然产物研究的热门领域。

山海绵属(Mycale)是寻常海绵纲(Demospongiae)，繁骨海绵目(Poecilosclerida)，山海绵科(Mycalidae)的重要种类，约有640多种。在福建东南沿岸广泛分布有叶片山海绵(Mycale phyllophila)，自然资源丰富。研究表明，叶片山海绵中含有吡咯醛类化合物，是该种海绵的特征性成分之一。据报道，吡咯醛类化合物对前列腺癌细胞DU-145、前列腺癌细胞LN-caP、卵巢腺癌细胞IGROV、黑素瘤细胞SK-MEL-28、肺腺癌细胞A-549、慢性粒细胞性白血病细胞K562、胰腺癌细胞PANC-1、结肠癌细胞HT-29、结肠癌细胞LOVO、结肠腺癌耐阿霉素细胞LOVO-DOX、子宫颈上皮腺癌HELA等均具有细胞毒性，部分化合物还能抑制人乳腺癌细胞的低氧诱导因子-1(HIF-1α)的表达，在抗肿瘤药物开发中具有重要价值。

吡咯醛类化合物种类多，结构相似度高，获得纯品天然物的难度极大。目前，尚未有从叶片山海绵中分离纯化系列吡咯醛类化合物的工艺报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种从叶片山海绵中分离吡咯醛类化合物的方法及其吡咯醛类化合物。本发明的方法能够快速富集和分离吡咯醛类物质，首次从该种海绵中得到了8个高纯度的吡咯醛类化合物，其中两个为首次报道的新结构化合物。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：

一种从叶片山海绵中分离吡咯醛类化合物的方法，包括：

1)将叶片山海绵破碎后，加入1～2倍量无水乙醇，在8000～12000r/min转速下湿法粉碎；粉碎后海绵加入4.5～5.5倍量无水乙醇浸泡6～8d，且每天超声振动辅助提取0.5～1.5h，然后固液分离，固体部分重复上述加入无水乙醇浸泡→超声振动辅助提取→固液分离的步骤若干次，合并得到的液体部分，得到海绵粗浸提液；

2)取步骤1)得到的海绵粗浸提液，回收溶剂至干，得到乙醇粗提物；向该乙醇粗提物中加入0.8～1.2倍量甲醇，产生的沉淀通过固液分离除去，液体部分回收溶剂至干，得到海绵总提取物；

3)向步骤2)得到的海绵总提取物中加入0.8～1.2倍量的水，制成混悬液；混悬液加入2.5～3.5倍量石油醚萃取，分出石油醚层，剩余部分重复上述石油醚萃取步骤若干次，合并得到的石油醚层，回收溶剂至干，得到石油醚提取物；最后一次石油醚萃取并分出石油醚层后的剩余部分加入2.5～3.5倍量二氯甲烷萃取，分出二氯甲烷层，剩余部分重复上述二氯甲烷萃取步骤若干次，合并得到的二氯甲烷层，回收溶剂至干，得到二氯甲烷提取物；合并石油醚提取物与二氯甲烷提取物，得到吡咯醛类总提取物；