[发明专利]一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体来说涉及一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物，同时还涉及该含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物的制备方法，及该含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物在烟草种子消毒方面的用途。

背景技术

烟草种子是传播烟草病原菌最主要的途径之一。烟草种传病原菌通常存在于种子表面或内部，或以各种病残体直接或间接混杂于种子之间。这些病原菌往往是烟草病害的初次浸染来源。被报道的烟草种子携带的病原菌有链格孢菌属（Alternaria sp.）、拟茎点霉属（Phomopsis sp.）、支顶孢属（Acremonium sp.）、柄孢壳属（Zopfiella sp.）、曲霉属（Aspergillus sp.）、镰孢菌属（Fusarium sp.）、青霉菌属（Penicillium sp.）、赤霉菌属（Gibberella sp.）、芽枝孢菌属（Cladosporium sp.）、离蠕孢属（Bipolarissp.）等，它们会引起烟草种子在储藏期或者发芽期的腐烂，导致种子发芽率低、烟苗素质下降等现象。此外，被报道种子传播引起的烟草真菌性病害有烟草炭疽病、烟草赤星病、烟草霜霉病和烟草低头黑病等。这些病害均可导致苗期和大田期烟草病害的大量发生，对烟草的生产造成严重损失。因此，亟待采取措施对烟草种子携带的病原菌进行处理，以提高种子的发芽质量。

微生物菌剂可以与病原菌竞争营养、空间位点，诱导植物产生抗病性，其次生代谢产物对病原菌具有抑制作用、对植物具有促生作用，且绿色、环保、安全，在植物病害的防治中具有重要的应用价值。因此，寻找环境友好的、高效、安全的微生物菌剂，将其与烟草种子病害处理剂混合使用或者与烟草种子病害处理剂复配成新型烟草种衣剂，并将其用于烟草的育苗或者烟草种子生产具有广阔的发展空间，同时也是烟草安全可持续发展的需要。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种能处理烟草种子携带病原真菌，具有较好防病作用，同时又环境友好，能显著促进烟苗生长的含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物。

本发明的另一目的在于提供该含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物的制备方法。

本发明的再一目的在于提供该含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物在烟草种子消毒上的用途。

本发明的一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物，其中：含嘧菌酯为10~40 µg/ml、咪鲜胺为5~10 µg/ml，解淀粉芽孢杆菌X60为1×10⁴~1×10¹⁰CFU/ml。

上述的一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物，其中：优选嘧菌酯30~40 µg/ml，咪鲜胺8~10 µg/ml。

本发明的一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将咪鲜胺和嘧菌酯用甲醇分别配成1×10³µg/ml的母液，4℃低温保存，待用；

（2）将解淀粉芽孢杆菌菌株X60在NB培养液30℃180rpm振荡培养36-48小时，然后6000-10000rpm离心10分钟收集解淀粉芽孢杆菌X60湿菌体，取X60湿菌体与菌体保藏液，按质量体积比为1:50配成菌剂，菌剂成品活菌浓度为1×10¹⁰-1×10¹²CFU/ml；

（3）将咪鲜胺、嘧菌酯、解淀粉芽孢杆菌湿菌体混合，配制成的组合物含嘧菌酯为10~40 µg/ml、咪鲜胺为5~10 µg/ml，解淀粉芽孢杆菌X60为1×10⁴~1×10¹⁰CFU/ml。

上述的一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物的制备方法，其中NB培养液的配制方法为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，加去离子水至1L，pH 6.8～7.2，经120℃灭菌20分钟。

上述的一种含解淀粉芽孢杆菌的杀菌剂组合物的制备方法，其中：菌体保藏液含0.01 mol/L磷酸盐缓冲液、0.001mol/L的Tween 40非离子型表面活性剂。