[发明专利]一种鲨鱼抗体来源的蛋白骨架及其应用

权利要求书

1.点纹斑竹鲨抗体，其序列如SEQ ID NO:3所示。

2.多肽，其特征在于以下结构：A-B-C，其中结构单元A表示序列RVEQTPTTTTKEAGESLTINCVLKGSSCALGSTYWYFTKKGATKKASLSTGGRYSDTKNTASKSFSLRISDLRVEDSGTYHCEAY(SEQ ID NO:1)；结构单元B表示抗体可变区；结构单元C表示EGGGTILTVK(SEQ ID NO:2)，其中结构单元A，B和C以肽键连接，其中所述抗体可变区为任意序列，长度为7-15个氨基酸，其中所述抗体可变区中存在一个半胱氨酸。

3.权利要求2所述的多肽在构建多肽文库中的应用。

4.多肽文库，其特征在于包含权利要求2所述的多肽。

5.权利要求4所述的多肽文库，其特征在于所述多肽文库为噬菌体展示多肽文库，细菌表面展示文库，酵母表面展示文库，核糖体展示文库，病毒表面展示文库，哺乳动物细胞表面展示文库，真菌表面展示文库。

6.权利要求5所述的多肽文库，其特征在于所述噬菌体展示多肽文库是与选自以下蛋白融合的噬菌体展示多肽文库：P3蛋白，P8蛋白或P9蛋白。

7.筛选多肽的方法，其特征在于将权利要求4或5所述的多肽文库与靶蛋白、多糖、核酸或脂类相接触。

8.权利要求7的方法，其中所述靶蛋白为人血清白蛋白。

9.蛋白，其特征在于利用权利要求4或5所述的多肽文库筛选获得。

10.权利要求9所述的蛋白，所述蛋白为SEQ ID NO：33-38任一个所述的序列。

11.权利要求9所述的蛋白，其中所述蛋白进一步修饰为糖基化衍生物，融合蛋白，共价或非共价结合复合物，偶联物或螯合物。

12.权利要求4或5所述的多肽文库在筛选药物或检测试剂中的应用。

13.构建权利要求4所述多肽文库的方法，其特征在于包含：

(1)构建质粒载体，其包含权利要求2所述的多肽序列，其中在结构单元B的两侧添加IIs类限制性内切酶的位点；

(2)根据结构单元B的长度和结构单元B中半胱氨酸的有无进行排列组合，设计作为抗体可变区的随机片段，所述随机片段两端添加IIs类限制性内切酶的位点；

(3)将步骤(1)的质粒载体与步骤(2)的随机片段通过IIs类限制性内切酶进行酶切后连接，然后转化宿主细胞。

14.权利要求13所述的方法，其中，所述IIs类限制性内切酶为BsaI,SapI,ESP3I,BsmBI,BBsI,BtgZI或BspQI。

15.权利要求13所述的方法，步骤(2)根据结构单元B的长度和结构单元B中半胱氨酸的位置进行排列组合，设计作为抗体可变区的随机片段。