[发明专利]一种用于稳定保存NAD或其衍生物的存储液

说明书

技术领域

本发明属于体外诊断领域，特别涉及一种用于稳定保存NAD或其衍生物的存储液。

背景技术

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideade－nine dinucleotide，缩写NAD)，也称二磷酸吡啶核苷酸，或辅酶Ⅰ，是一种转递质子的辅酶。它参与细胞物质代谢、能量合成、细胞DNA修复等多种生理活动。NAD是各种脱氢酶的共同底物，因此在体外诊断试剂盒中具有广泛应用。

一般商业化的试剂盒要求在2-8℃的条件下能够稳定12个月或以上；然而NAD或者NAD类似物在溶液中易水解，很不稳定，为含此类化合物的试剂盒商业化带来困难。

专利US4394449提供了一种使用非水溶剂溶解NAD，制作试剂盒的方法。该法为抑制NAD水解，采用1,2-丙二醇为溶剂溶解NAD。专利US6162615提到了一种使用GOOD’S缓冲液以及重金属盐作为NAD保护剂的方法。前者大量使用有机溶剂，价格较高，而且会对环境造成不利影响；后者需要使用重金属盐作为保护剂，而重金属对环境以及蛋白的稳定性都有潜在危害。

此外，国内试剂盒使用GOOD’S缓冲液存储NAD，但是其缓冲液的其他成分并未公开。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于稳定保存NAD或其衍生物的缓冲液。

本发明的再一目的在于提供一种NAD或其衍生物的存储液。

本发明的另一目的在于提供一种包含上述NAD或其衍生物的存储液的试剂盒。

本发明所采取的技术方案是：

一种用于稳定保存NAD或其衍生物的缓冲液，所述缓冲液是在20-50mmol/L的MES-NaOH缓冲液的基础上，添加质量百分比浓度为0.5-4.0％的右旋糖酐和0.1-0.5％的Proclin300。

优选的，NAD衍生物包括NADP、S-NAD、Thio-NAD。

该缓冲液中，MES-NaOH缓冲液是用于调节pH，右旋糖酐和Proclin300可以作为保护剂，减缓NAD或其衍生物在溶液中的分解速度。

使用该缓冲液可配制稳定的NAD以及NAD衍生物比如NADP、Thio-NAD溶液，NAD或其衍生物溶液在该缓冲液中的添加量优选为0.1-1.5％。可用于乳酸脱氢酶、葡萄糖、总胆汁酸测定试剂盒。

一种NAD或其衍生物的存储液，所述存储液是在20-50mmol/L的MES-NaOH缓冲液的基础上，添加质量百分比浓度为0.5-4.0％的右旋糖酐、0.1-0.5％的Proclin300和0.1-1.5％的NAD或其衍生物。

优选的，NAD衍生物包括NADP、S-NAD、Thio-NAD。

该存储液中，MES-NaOH缓冲液是用于调节pH，右旋糖酐和Proclin300可以作为保护剂，减缓NAD或其衍生物在溶液中的分解速度。

该存储液可用于乳酸脱氢酶、葡萄糖、总胆汁酸测定试剂盒中。

一种试剂盒，所述试剂盒中包括上述任一项所述的NAD或其衍生物的存储液。

优选的，所述试剂盒包括乳酸脱氢酶测定试剂盒、葡萄糖测定试剂盒、总胆汁酸测定试剂盒中的至少一种。

本发明的有益效果是：

本发明通过使用去离子水作溶剂，利用MES-NaOH缓冲液调控溶液pH值和添加少量保护剂达到稳定保存NAD或者NAD衍生物的目的。

本发明缓冲溶液配置得到的NAD或其衍生物溶液性质稳定，2-8℃条件下可以稳定保存18个月。

具体实施方式

本发明避免了大量使用有机溶剂或者重金属盐，通过使用去离子水作溶剂，利用MES-NaOH缓冲液调控溶液pH值和添加少量保护剂达到稳定保存NAD或者NAD衍生物的目的。组成如下：

氧化型辅酶存储液

该存储液可用于乳酸脱氢酶、葡萄糖、总胆汁酸测定试剂盒。

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。

实施例1

用于乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒，该试剂盒由底物缓冲液和辅酶存储液两部分构成，试剂盒组成见表1：

表1乳酸脱氢酶测定试剂盒组成

氧化型辅酶存储液在2-8℃条件下保存18个月后与新配的反应缓冲液配套使用，在日立全自动生化分析仪7080上测定结果，并和市售产品进行对比，结果见表2。

表2生化分析仪测定结果