[发明专利]一种牛羊乳清粉混掺定性半定量检测鉴定方法

说明书

本发明公开提供了一种牛羊乳清粉混掺定性半定量检测鉴定方法，该方法不仅有效、还可以定性以及半定量分析鉴别出牛、羊乳清粉混掺，操作简单、发明可行性高，成本低廉、简单易行，应用范围广泛，具有良好的市场开发前景。具体所述方法包括：牛羊乳清粉样品前处理、BCA法测定样品原液蛋白含量、Native‑PAGE、盲检验证步骤。其中盲态检测正确率为100％，混掺比例亦可进行量化评判，该法可用于生产中牛羊乳清粉纯度质量评定，即可进行混掺样品的定性半定量初步判定。

技术领域

本发明属于乳制品检测领域，具体涉及一种牛羊乳清粉混掺定性半定量检测鉴定方法。

背景技术

当前牛乳清蛋白粉占据市场的较大份额，在以牛乳为主导的婴幼儿配方食品市场上，因其富含的α-酪蛋白和β-乳球蛋白是引起蛋白过敏反应的重要成分对部分婴幼儿特别是不能耐受牛乳、患肠胃道疾病婴幼儿急需别的乳源代替牛乳，同时伴随着近些年对牛羊乳在各方面的比较研究，羊乳的丰富营养价值逐渐被体现，并在过敏反应、吸收率等方面比牛乳显现了更多的优越性。以羊乳为原料的乳制品也逐渐占据市场份额，尤其是婴幼儿配方羊乳粉的热销，更是让羊乳清蛋白的生产应用得到了广泛关注。而乳清蛋白的含量是检测婴幼儿配方羊奶粉营养价值的一项重要指标。如今，国内生产的婴幼儿配方奶粉中的乳清粉大部分是从美国和欧洲进口的，并且羊乳清粉价格高于牛乳清粉，同时相比于牛乳，羊乳资源的相对匮缺，致使其市场价高量少，在利益驱动下不法商贩将牛乳清粉掺入以羊乳为原料的婴幼儿配方食品中降低成本。

国际贸易对羊乳制品纯度要求高(大于95％)，羊乳制品企业在生产经营过程对原料及产品的保真性检验是一个急待解决的问题，基于牛羊乳成分的差异比较研究是解决羊乳中掺入牛乳成分的技术关键(宋宏新2013)。

目前，国内外在牛乳乳清蛋白的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的分离检测方面有较多的研究，但在牛羊乳清蛋白的异同发展研究方面并没有太多的涉及。

发明内容

针对现有技术中的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种牛羊乳清粉混掺定性半定量检测鉴定方法，该方法不仅有效、还可以定性以及半定量分析鉴别出牛、羊乳清粉混掺，成本低廉、简单易行。

一种牛羊乳清粉混掺定性半定量检测鉴定方法，该鉴定方法采用 Native-PAGE对牛羊乳清粉混掺进行区分性鉴定，7％～13％(m/m)为羊乳清粉中混掺牛乳清粉的检出限，羊乳清粉中混掺牛乳清粉的定量检测最大误差≦10％。

具体的，所述的Native-PAGE的鉴定条件包括：质量百分含量为8％～ 16％的分离胶，预电泳电流为10～16mA，样品分离电泳的电流为25～35mA，电泳温度为0～4℃。

还有，所述的Native-PAGE的鉴定条件还包括上样蛋白浓度，上样蛋白浓度为3.0～35μg/μL。

更具体的，在进行Native-PAGE之前还需进行牛羊乳清粉混掺的前处理得到待鉴定样品，前处理包括：将牛羊乳清粉混掺的水溶液在4000～ 6500r/min条件下离心10～20min所得的滤液即得。

还有，所述的牛羊乳清粉包括牛羊脱盐乳清粉和牛羊浓缩乳清蛋白粉，牛羊脱盐乳清粉的待鉴定样品的上样蛋白量为32μg～15μg；牛羊浓缩乳清蛋白粉的待鉴定样品的上样蛋白量为25μg～11μg。

本发明的优点包括：

本发明提供了一种新型、快速鉴别检测牛羊乳清粉混掺的有效方法；本发明操作简单、发明可行性高，成本低廉、简单易行，应用范围广泛，具有良好的市场开发前景。

附图说明